ラット肥満細胞リン酸化反応に関する研究(第2報) 顆粒膜Phosphatidylinositol kinase
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概要
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ラット肥満細胞を細胞破さい装置により破さいした後Percoll比重法により顆粒を分離した．形態学的に膜の保たれた正常穎粒をMg<SUP>2+</SUP>またはMn<SUP>2+</SUP>の存在下に[γ<SUP>32</SUP>P]ATPと反応させると<SUP>32</SUP>P標識diphosphoinositide(DPI)カミ産生された．[α<SUP>32</SUP>P]ATPを用いても<SUP>32</SUP>P標識DPIは認められず，DPI産生はMg<SUP>2+</SUP>またはMn<SUP>2+</SUP>およびATPに依存したことよりラット肥満細胞顆粒膜にはphosphatidylinositol kinaseが存在することが明らかになった．本酵素のATPのKm値は25 μMであった．Mg<SUP>2+</SUP>，Mn<SUP>2+</SUP>がそれぞれ20 mM，2 mMにおいて最大の反応がみられたが，双方の2価イオン共存下ではそれぞれ単独の際に比しDPI産生量は増加しなかった．反応は速やかで，反応温度に関しては28°Cで最大の反応が認められた．Ca<SUP>2+</SUP>，F<SUP>+</SUP>，cyclic AMPはそれぞれ5 mM，5 mM，30 μM以上において濃度に依存してDPI産生量を抑制した．
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