ラット肥満細胞リン酸化反応に関する研究(第3報) ラット白血病細胞RBL-1 cell由来，Ca<SUP>2+</SUP>，リン脂質，Diacylglycerol依存性Protein kinase
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概要
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ラット白血病細胞RBL-1 cellをプロテアーゼインヒビター，2-mercaptoethanol，2価イオンキレート剤の存在下に細胞破砕装置で破砕し，DEAE celluloseカラムクロマトグラフィーを行い，流出液のprotein kinase活性を測定し，以下の結果を得た．1) 2つの異なった酵素活性のピークが得られた．0.1〜0.12MNaClで認められた大きな酵素活性はCa<SUP>2+</SUP>に依存した．小さな酵素活性はcyclic AMPに依存した．cyclic GMPに依存する酵素活性は認められなかった．2) Ca<SUP>2+</SUP>依存性protein kinaseをSephadex G-150カラムクロマトグラフィーによりさらに精製し分子量を求めると65,000〜70,000であった．3) 酵素活性はdioleinにより増加したが，他のdiacylglycerolあるいはmono，triglycerideには影響されなかった．4) 酵素活性はdibucaine，tetracaine，procaineの局所麻酔剤およびchlorpromazineにより抑制された．5) 各種リン脂質を用いた検討ではphosphatidylserineが最も強く酵素活性を増加した．phosphatidylinositol，phosphatidic acidおよびphosphatidylethanolamineによる酵素の活性増加程度は少なく，phosphatidylcholineは酵素活性に影響しなかった．以上ラット白血病細胞RBL-1 cell中にCa<SUP>2+</SUP>，リン脂質，diacylglycerol依存性protein kinaseいわゆるprotein kinase Cの存在を証明した．
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