イヌの卵胞刺激ホルモン(FSH)と黄体形成ホルモン(LH)のラジオイムノアッセイ
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概要
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第一抗体に抗ヒトFSH抗体および抗ヒツジLH抗体を用い,標識ホルモンにラットFSHおよびラットLHを用いて,イヌのFSHおよびLHのラジオイムノアッセイ(RIA)の設定を試み,高感度なRIAを安定して実施できることが判明した.RIA操作の概要は以下に示す通りである.イヌFSH-RIA:BSA・RIA緩衝液を加えて全量を200μ1とした血清(血漿)サンプルをとり,第一抗体100μlを加えて32Cで24時間反応させる.これに標識ホルモン50μlを添加し,32Cで24時間反応させた後,第二抗体100μlを加えてさらに4Cで24時間反応させる.4C,1700gで30分間遠心分離して得られた沈澱の放射活性をY-カウンターにて測定する.標準溶液から得られた標準反応曲線を用い,サンプルのFSH濃度を算出する.イヌLH-RIA:BSA・RIA緩衝液を加えて全量を150μlとした血清(血漿)サンプルをとり,第一抗体50μlを加えて4Cで24時間反応させる.これに標識ホルモン50μlを添加し,4Cで24時間反応させる.第二抗体以降の処理は, FSH-RIAと同様に行い,標準溶液から得られた標準反応曲線を用い,サンプルのLH濃度を算出する.本法により,各種生理的条件下のイヌ血中FSHおよびLHの測定を試みた結果,両RIAによる標準曲線とイヌ下垂体抽出液および各種イヌ血漿の用量反応曲線は良く平行し,イヌの血漿25〜100μlで測定可能であることが判明した.
- 日本繁殖生物学会の論文
著者
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森好 政晴
酪農学園大学獣医学部
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中田 健
酪農学園大学獣医学部獣医学科衛生環境教育群ハードヘルス学ユニット
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渡辺 元
東京農工大学大学院
-
田谷 一善
東京農工大学大学院
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中尾 敏彦
酪農学園大学獣医学科
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土屋 英路
酪農学園大学獣医学部獣医学科獣医臨床繁殖学教室
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