IgA腎症患者におけるMass Spectrometry(MS)を用いたIgA結合蛋白の解析
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概要
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目的 : IgA腎症の病因にIgA免疫複合体(IgA-IC)の関与が議論されているが,いまだその抗原は同定されていない.今回われわれはMSを用いて,血清中のIgA結合蛋白を解析することで,抗原の有無を検討した.対象 : IgA腎症患者6名,扁桃摘出術とステロイドパルスの併用療法3クールを完了したIgA腎症患者5名と健常人8名を解析した.方法 : 血清400μlとジャカリンを混合結合させた後,0.8Mガラクトースで溶出した.溶出した蛋白はSuperdex 200 10/300GLカラムで分画し,各分画より蛋白を抽出し,電気泳動後,liquid chromatography-electron spray ionization masss pectrometry(LC-ESIMS)で解析した.さらに,治療前後の血清から得たジャカリン結合蛋白をWestern blottingにて定量的に比較した.結果 : IgA1/IgA1結合蛋白は170kDa,340kDa,680kDa,680kDa以上の4つのピークに分画化された.それぞれの分画において,MSの解析ではapolipoprotein, immunoglobulin(Ig)heavy chain(α,μ,γ), light chain, Ig J chain, fibronectin, C1INA, C4bp, α 1MGなどの内因性物質が認められた.特に,C4bpは患者群で高頻度に認められた.治療後では,170kDaと680kDa以上の蛋白濃度が上昇し,340kDaの蛋白濃度が低下する傾向にあった.また,IgA1結合IgG,C4bp,C3の発現量は,治療後に減少していた.結論 : 今回の検討では,IgA1結合蛋白中に明らかな外来性抗原を確認することはできなかったがIgGやC4bPはIgA腎症の病因に重要な役割を果たしている可能性が考えられた.
- 2007-03-31
著者
-
富野 康日己
順天堂大学腎臓内科
-
藤村 務
順天堂大学研究基盤センター生体分子研究部門
-
高 ひかり
順天堂大学生体分子研究部門
-
堀越 哲
順天堂大学医学部内科学教室腎臓内科学講座
-
峯木 礼子
順天堂大学生体分子研究部門
-
上野 隆
順天堂大学医学部生化学第一
-
藤村 務
順天堂大学研究基盤センター・生体分子研究部門
-
鈴木 祐介
順天堂大学医学部内科学教室腎臓内科学講座
-
村山 季美枝
順天堂大学医学部中央幾器分析室
-
村山 季美枝
順天堂大学
-
田中 裕一
順天堂大学医学部内科学教室腎臓内科学講座
-
堀越 哲
順天堂大学 医学部腎臓内科学
-
坂本 慶子
順天堂大学医学部内科学教室腎臓内科講座
-
鈴木 祐介
順天堂大学 腎臓内科
-
富野 康日己
順天堂大学医学部内科学教室腎臓内科学講座
-
上野 隆
生化学第一
-
上野 隆
順天堂大学医学部生体分子研究部門
-
藤村 務
同
-
堀越 哲
順天堂大学医学部腎臓内科
-
高 ひかり
順天堂大学大学院医学研究科研究基盤センター生体分子研究室
-
藤村 務
順天堂大学医学部生化学第二講座
-
上野 隆
順天堂大学・医学部・生化学第一講座
-
富野 康日己
順天堂大学
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