TTC還元力による葉肉プロトプラスト代謝活性の評価
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概要
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葉肉プロトプラストのトリフェニルテトラゾリウムクロライド(TTC)還元力を測定することによって,プロトプラストの代謝活性を評価する方法を確立した.葉肉プロトプラストを0.05%リン酸緩衝液(pH7.4)に懸濁し,16時間30℃,暗黒下で培養した.不溶性のフォルマザンは80%のエタノールでプロトプラストから抽出し,520nmの吸光度を測定した.ショ糖浮遊法で精製したナタネ葉肉プロトプラストはTTCを還元したが,細胞の破片からなる画分はTTC還元力を示さなかった.ペチュニアの葉肉プロトプラストをN-メチル-N-ニトロ-N-ニトロソグアニジン(MNNG)で処理し,TTC還元力とコロニー形成率の関係を調べた.その結果,TTC還元力はMNNG濃度の増加とともに減少したが,コロニー形成率はMNNG濃度が25μg/mlに達すると急激に減少した.コロニー形成率はプロトプラストの活性を反映しているので,TTC還元力からプロトプラストの代謝活性を推定できるものと思われる.
- 千葉大学の論文
- 1992-03-25
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