Theileria sergenti感染の検出用DNAプローブの作出
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概要
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小型ピロプラズマ病の新しい検出法としてTheileria sergentiメロゾイトの組み換えDNAプローブを作出し, ハイブリダイゼーションによる赤内型メロゾイトの検出を試みた. T. sergentiの遺伝子ライブラリーはpUC-18ベクターを用いて作出し, コロニーハイブリダイゼーションとサザンハイブリダイゼーションでスクリーニングしT. sergentiに特異的なクローン8個を得た. そのうち2個のクローンのインサートを精製し^<32>P-dCTPあるいはビオチン-11-dUTPで標識しプローブとして用いた. ドット・ブロットハイブリダイゼーションで, 精製したT. sergentiのDNAを用いた場合, ^<32>P標識プローブは15pg (約1,200個のメロゾイトに相当), ビオチン標識プローブでは125pg (約10,000個のメロゾイトに相当) を検出できた. T. sergenti感染赤血球を用いた場合のメロゾイトの検出限界は, ^<32>P標識プローブで8,000個, ビオチン標識プローブで16,000個であった.
- 1990-12-15
著者
-
小沼 操
北海道大学大学院獣医学研究科感染症学教室
-
桐沢 力雄
酪農学園大学獣医学部
-
川上 善三
酪農学園大学獣医学科家畜微生物学教室
-
川上 善三
酪農学園大学獣医学科獣医微生物学教室
-
桐沢 力雄
酪農学園大
-
桐沢 力雄
酪農学園大学 獣医解剖
-
桐沢 力雄
酪農学園大学微生物学教室
-
小沼 操
北海道大学 大学院獣医学研究科感染症学教室
-
Kirisawa Rikio
Veterinary Microbiology Rakuno Gakuen University
-
梶原 典子
酪農学園大学獣医微生物学教室
-
川上 善三
酪農学園大
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