クレアチニンデイミナーゼ固定化キトサンビーズカラムを用いるクレアチニンのフローインジェクション分析(<特集>流れを利用する新しい分析技術)
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概要
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慢性腎不全の悪化の指標として用いられているクレアチニンを定量するため, キトサンを担体とした固定化酵素を充填した反応カラムを組み込んだフローインジェクション分析法の開発を試みた.固定化酵素はSchiff塩基反応によるグルタルアルデヒド架橋法により, キトサンビーズにクレアチニンデイミナーゼを固定化(CD-IE)し調製した.リン酸緩衝溶液をキャリヤーとし, その流れの中に試料を注入する.注入された試料はCD-IEカラムで, アンモニアに変換され, その後, 水酸化カリウムで塩基性とし, ガス拡散装置に導入され, クレゾールレッド及び2-{4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジニル}エタンスルホン酸の流路と合流し, 波長555nmにおける吸光度を測定した.本法では, CD-IEカラムでクレアチニンからアンモニアに変換され, アンモニアの濃度により間接的にクレアチンが定量される.尿検査自動分析の校正用のコントロール尿について, 標準添加法を適用して得られた定量値は参照値とほぼ一致した.
- 2005-12-05
著者
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