Pseudomonas syringae pv. eriobotryaeプラスミド上の病原性遺伝子psvAの分離と解析
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概要
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ビワがんしゅ病菌(Pseudomonas syringae pv. eribotryae)の52Mdalプラスミド由来の病原性遺伝子を含むDNA断片(23kb)をpLAFR3に挿入して得られたpVIR6から病原性遺伝子を単離するためサブクローニングや欠失を試みた。その結果,挿入断片が約7kbで,病原性を有するpKPN35が得られた。この挿入断片の塩基配列を調べた結果,全長が6961bpで,4つのオープンリーディングフレーム(OPF)の存在が示唆された。ORF1(480Bp)とOPF4(516bp)は既知の遺伝子と相同性はなかった。ORF2(969bp)の塩基配列から想定されるアミノ酸配列は大腸菌IS5のトランスポザーゼと相同性が認められた。ORF3(2193bp)領域のみを含むpNSF1は52Mdalプラスミドが欠落し,病原性を失ったビワがんしゅ病菌PE0に病原性を回復させた。しかし,pNSF1のORF3から580bpのBassHII断片を欠失させたプラスミドは病原性を回復させることはできなかった。以上の結果はORF3が病原性遺伝子であることを示しており,psvAと命名した。psvAの上流にはHrpLdependent promoterの共通配列が認められた。psvAの塩基配列から想定されるタンパク質psvAは731のアミノ酸からなり,その分子量は83.2kDaであった。psvAは既知のタンパク質と相同性は認められなかったが,Pseudomonas syringae pv. glycineaのavrA遺伝子のN末端領域との相同性が認められた。psvAを発現用ベクターpET-3aに組み込み,大腸菌でのタンパク質発現を調べた結果,pavAの想定分子量とほぼ同じ分子量を有するタンパク質の発現が認められた。サザンハイブリダイゼーション分析により,psvAがヤマモモこぶ病菌(P.syringae pv. myricae)とカクレミノこぶ病菌(P. syringae pv. dendropanacis)にも保持されていることが明らかになった。
- 日本植物病理学会の論文
- 1999-10-25
著者
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