ブルーデキストランアフィニティクロマトグラフィーによるCandidaピルビン酸キナーゼの迅速精製とその吸着機構
スポンサーリンク
概要
- 論文の詳細を見る
ブルーデキストランアフィニティクロマトグラフィーによるCandidaピルビン酸キナーゼの迅速精製とブルーデキストラン-セファロースヘの本キナーゼの吸着機構について検討を加えた。本キナーゼを含む粗酵素破をブルーデキストラン-セファロースカラムに添着し,低濃度の塩化カリウム,ピロリン酸,あるいはNADH,NADPおよびAMPなどのヌクレオチド類でカラムを洗浄したあと,塩化カリウム(0-1M),MgCl_2(0-0.5mM)およびフルクトース1, 6-ジリン酸(0-5mM)の共存濃度勾配溶出法により本酵素を溶出させた。次にセファデックスG-50ゲルクロマトグラフィーに供し酵素を精製した。二段階の精製操作で本キナーゼは比活性が35.9倍上昇し約40%の収率で精製され,電気泳動的に均一な酵素標品を得ることができた。チバクロンブルーF3GAによるCandidaピルビン酸キナーゼの阻害は,アロステリック賦活剤であるフルクトース1, 6-ジリン酸の濃度を飽和条件としても解除されなかった。ブルーデキストランとチバクロンブルーF3GAによる阻害実験の結果から,本キナーゼ上の基質結合部位がブルーデキストラン-セファロースヘの吸着に関与していることが示唆された。さらに,ADPおよびホスホエノールピルビン酸のいずれか一方の基質が飽和レベルの場合,本キナーゼの活性中心あたり1分子のチバクロンブルーF3GAが作用した他面基質濃度が不飽和レベルの場合には2分子の色素が作用することが判明し,チバクロンブルーF3GAの作用分子数が基質濃度に依存していることを認めた。
- 1988-12-25
著者
-
河合 啓一
岐阜大学農学部
-
河合 啓一
岐阜大・農・生物資源利用
-
堀内 みどり
岐阜大学農学部環境計画学研究室
-
堀津 浩章
中京女子大・健科
-
堀津 浩章
岐阜大学農学部
-
後藤 敦子
岐阜大学農学部生物資源利用学科
-
堀内 みどり
岐阜大学農学部生物資源利用学科
関連論文
- 輸入果実酢中の二酸化イオウ及びソルビン酸の残存量の実態調査
- 植物系廃棄物の有効利用を目的としたデータベース作成
- 442 バイオリアクターを用いたウスターソース発酵プロセスの動力学的研究
- 253 バイオリアクターによるウスターソースの新製造プロセスに関する研究
- 671. ウスターソースの新製造プロセスに関する研究
- 108 牧草より酵母蛋白の生産
- CandidatropicalisのXylose reductase遺伝子のE. coliにおける発現とキシリトール生産 : 微生物
- ニホンツキノワグマ(Ursus thibetanus japonicus)によるクマハギの発生原因の検討
- ピーナッツ殻を減量としたCandida tropicalisによるキシリトール生産培地の創製
- 344 ビフィズス菌の生産するD-Xylose isomeraseのサブユニット構造および活性中心に関する研究
- 332. ビフィズス菌のFructikinaseの精製とその諸性質について
- 329. ビフィズス菌の生産するD-xylose Tsomeraseの単離精製とその諸性質について
- 622 ビフィズス菌の糖代謝関連酵素系の研究
- 117 Bifidobacteriumにおけるペントース代謝活性
- 411 カドミウム耐性菌の耐性機構とその遺伝学的解析
- 銅耐性酵母の分離とその菌体への取込みについて : 微生物による重金属化合物の回収に関する研究(第4報)
- 発酵・合成組み合わせ法にもとづく不斉l-型エフェドリンの製造法 : 微生物
- 微生物・化学合成組み合わせ法によるL-エフェドリンの製造法 : 微生物
- Aeromonas caviae ME-1由来のキシラナーゼI遺伝子xynAの解析とEscherichiacoliでの発現 : 微生物
- 121 Aeromonas caviae ME-1のキシラナーゼ遺伝子のクローニング
- 128 カドミウム耐性菌Psendomonas putida GAM-1保有プラスミドpGU100からのカドミウム耐性遺伝子のクローニング
- 334 アクリル酸資化性菌の検索 (第二報) : アクリル酸の抗菌性に対する2価陽イオンの影響、及びβ-ヒドロキシ酸の生産
- 349 海面埋立廃棄物処分地汚水処理施設における微生物相
- 海面埋立廃棄物処分場内高率酸化池におけるミクロフローラ
- ニホンツキノワグマ(Ursus thibetanus japonicus)による林木剥皮と林床植生の関係
- ニホンツキノワグマの食物現存量の季節変化
- ニホンツキノワグマによる造林木被害発生機構とその防除法の研究
- マンガンイオンで有害物を分解する酵素
- D-Xylose、D-Glucose同時加流法によるXylitol生産 : 生物化学工学
- Cr(VI)耐性Pseudomonas ambigua G-1のCr(VI)還元酵素遺伝子のEschelicia coliにおける発現 : 微生物
- 646 Cr(VI)耐性菌Pseudomonas ambigua G-1のCr(VI)還元酵素遺伝子(chrR)のクローニングと遺伝子解析
- 456 Xylitol生産におけるGlucose流加の効果
- 409 不織布吸着法によるXylitol生産
- 385 実験計画法によるコウジ酸発酵の最適化
- 135 E.coli D-キシロースイソメラーゼ遺伝子変異株の構築とBifidobacterium adolescentis D-キシロースイソメラーゼ遺伝子のクローニング
- 337. Candida tropicalisのD-Xylose reductaseに関する研究
- 339 Streptomyces sp.YB-1によるイッテルビウムの集積
- マニラ麻アルカリ蒸解廃液を培養基質とした Aspergillus terreus によるアルカリ性リグニング分解酵素の生産
- 662 ___-
- 明日を拓くバイオテクノロジー(化学への招待)
- 果実酢の品質に関する研究 : 第1報 : 開栓保管中に減少するワインビネガー中の残存二酸化イオウ
- 127 Nitrosomonas europaeaによるアンモニア及びヒドロキシルアミンの酸化について
- 酵母および細菌によるベンゾ(a)ピレンの吸収挙動について : 微生物における毒性有機化合物吸収に関する研究(第1報)
- カドミウム耐性菌の分離とその菌体への取込みについて : 微生物による重金属化合物の回収に関する研究(第3報)
- 215 バイオリアクターを組み入れたビールの速醸法
- 457 牧草搾汁より酵母培養生産の実用化及び経済性アセスメントについて
- ブルーデキストランアフィニティクロマトグラフィーによるCandidaピルビン酸キナーゼの迅速精製とその吸着機構
- 海面埋立地内高率酸化池の微生物学的汚濁海水処理機構
- 334 固定化酵母を使用した糖定量自動分析装置の試作
- 272 プロトプラスト融合による醤油酵母の育種
- 1-5固定化酵母によるビールの速醸法(一般講演)
- 463 バイオリアクターを取り入れた牧草搾汁より酵母の培養
- 238 セラミック担体固定化酵母を用いた醸造食品の新しい製造法
- 617 アクリル酸資化性菌の検索 (第一報) : β-ヒドロキシプロピオン酸の生産
- セラミックスリアクターによる低アルコール清酒の生産(第2報)吸着酵母の再使用及び連続醗酵(微生物-醸造-)
- Pseudomonas putida GAM-1株のカドミウム耐性機構(第4報)(微生物-プラスミド, 核酸, 生理活性物質-)
- 固定化Aspergillus terreusを用いてのイタコン酸生産に対する影響因子について
- 242 Rhizopus oryzae固定化菌体による L-乳酸の生産(第二報) : 添加剤の影響について
- チバクロンブルーによる酵母ホスホグリセリン酸キナーゼ阻害反応の動力学
- 330 Rhizopus oryzae固定化菌体による乳酸の生産
- 323 Blue dextranと酵母Pyruvate Kinaseとその相互作用について
- 250 Aspergillius niger固定化菌体によるクエン酸の生産
- Klebsiella pneumoniaeによるアセトイン系化合物の生合成機構について
- Taka-proteinaseによるtaka-amylase Aの分解
- 酢酸フェニル水銀および酢酸水銀耐性菌の分離とその菌体への取込みについて
- 昇汞耐性菌の分離とその菌体への取込みについて
- デヒドロ酢酸分解細菌の分離とその代謝生成物について
- Pseudomonas sp. C-5-1株の生産するdehydroacetic acid hydrolaseおよびtriacetic acid lactone hydrolaseの部分精製とその性質
- 大腸菌のL-グルタミン酸脱炭酸酵素に関する研究(第3報) : L-グルタミソ酸脱炭酸酵素の生体内役割について
- 醸造酵母サッカロミセス・セレビシエによるトレハロースの簡易生産法について
- 生物生産系廃棄物の有効利用について
- Distribution of Sulfate-reducing Bacteria at a Sea-based Solid Waste Disposal Site and Their Role on Insolubilization of Heavy Metal Ions in Leachate
- Agricultural Waste Peanut Shells, a Raw Material for the Production of Xylose and Xylooligosaccharides