様々な野菜可食部組織を用いたDNAフィンガープリント法の開発(育種・遺伝資源)

概要

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33種類の野菜可食部から, 微量サンプル抽出法で得られたタンパク質の混入度(A260/A280)は, いずれも1.8以上で, PCRに適する値が得られた.しかし, リーフレタス, ゴボウから得られたDNA溶液は褐色を呈し, PCR阻害がみられた.しかし, このような場合, 最終濃度10mMの2-メルカプトエタノールをDNA溶液に添加し, Nucleon PhytoPure Kitで精製することで, 着色がなくなり, PCR阻害もみられなくなった.増幅可能となったDNAを用いて, 6プライマー組合せについて蛍光AFLP分析を行ったところ, 各材料で総数65〜249のピークがそれぞれ得られた.野菜の種類ごとに適したプライマー組合せを選択することで, 品種識別を効率的に行う手段になり得るものと考えられる.さらに, 他殖性作物における品種識別の可能性を検討するために, ネギ16品種・系統それぞれにおいて16個体を混合して作製したDNAサンプルを用いたAFLP分析を行った.その結果として得られたDNAフィンガープリントを比較することにより, 用いた品種・系統を相互に識別することが可能であった.
園芸学会の論文
2005-06-15