Fluorescent Determination of Creatine Phosphokinase Isoenzymes
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概要
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A high sensitive micro assay for Creatine phosphokinase (CPK) isoenzyme activity based on Bondar's method is described.<BR>Three kinds of fraction of CPK isoenzyme, MM, MB and BB, in serum were separated by means of stepwise gradient liquid chromatography through a micro column contained DEAE Sepharose CL-6B (1.5×70mm) utilised three kinds of buffered sodium chloride solution (pH 7.5) that are 30mM for MM, 145mM for MB and 300mM for BB.<BR>The separated fractions were determined its activity by spectrofluorometry (Ex 340nm, Em 460nm) of NADH generated from CPK reaction (Oliver-Rosalki s method).<BR>It is able to measure the activity of CPK about 0.1mU/mleasily, so this method is applicable to a low activity of CPK isoenzyme such as BB and MB in the case of early myocardial infarction and a micro sample of new born baby.
- Japan Society of Clinical Chemistryの論文
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