アユの体表粘液および血清中の抗体の精製と特性
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概要
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Immunoglobulin(Ig)in the skin mucus of ayu was purified and some biochemical charac-teristics of the purified Ig were compared with those of the purified serum Ig of ayu. Formalin-killed cells of Vibrio anguillarum emulsified with Freund's complete adjuvant was administered to ayu by intraperitoneal injection. Three weeks after immunization, the skinmucus was collected by scraping off the fish body surface with plastic blade. The serum was obtained from the blood taken by severing the caudal peduncle. The Igs in the skin mucus and the serum were purified separately by salting-out with 50% saturated ammonium sulfate, gel filtration on Sephacryl S-300 and ion exchange chromatography on DEAF-Toyopearl 650M. The agglutinating antibody titers of the mucus and the serum were 1:16 and 1:64, respec-tively. Agglutinating activities of both Igs were observed in the fractions right after the void volume from the column of Sephacryl S-300. The Igs from the skin mucus and the serum were eluted at about 0.07M NaCl and at 0.05-0.09M NaCl, respectively, in the linear gradient of NaCl on DEAE-Toyopear1650M. After rechromatography on Sephacryl S-300, both purified Igs gave a single band at the same position on polyacrylamide gel electrophoresis. These purified Igs lost their agglutinating activities by 2-ME treatment and the molecular weights of these Igs were estimated to be about 900, 000 on gel filtration. From these results, it was concluded that the Igs purified from both the skin mucus and the serum of immunized ayu are indistinguishable in biochemical characteristics, and that they are immunoglobulins of IgM type with high molecular weights.
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