タバコ野火病菌のグルタミン合成酵素遺伝子の解析

概要

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本研究ではタバコ野火病菌のタブトキシン耐性遺伝子としてクローニングされたGS遺伝子について,塩基配列の解析を行った。GS遺伝子を含む約11kbゲノムDNAについて,GS欠損変異株の大腸菌YMC11株を用いた相補性試験により約1.4kbのゲノムDNA断片をサブクローニングした。この塩基配列を決定した結果,他のグラム陰性細菌におけるGS遺伝子の塩基配列に比べ,5'末端から約30bp,N末端からアミノ酸配列で約10残基,短いことが明らかになった。そこで,GS活性を有する約2.5kbDNA断片を用いて5'末端の塩基配列を決定した結果,本遺伝子は,塩基数1407bpのORFからなり,アミノ酸468残基をコードすることが明らかとなった。また,アミノ酸配列によるホモロジー検索の結果,グラム陰性細菌のGSと高い相同性が認められた。さらに,GSで特徴的な4カ所の保存領域のいずれもが保存されており,GS Iに特徴的なATP binding siteのリジンや金属イオン結合部位であるヒスチジンを含むペンタペプチド配列,アデニリル化部位のチロシンの存在が認められた。
明治大学の論文
2002-03-25