腐敗病細菌のペクチン質分解酵素ペクチントランスエリミナーゼの組織崩壊作用
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概要
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腐敗病細菌, N-6301株のペクチントランスエリミナーゼ(endo-PTE)を純化して, 本酵素の組織崩壊作用を検討した。該菌株の培養液より調整した遠沈上澄液に, 硫安を0.2〜0.6飽和になるように加えて, 共存するペクチン酸トランスエリミナーゼ(PATE)をとりのぞき, PTE活性に富む画分を得た。この硫安塩析物を0.005MpH6.2のリン酸緩衝液で透析したのち, 同一緩衝液で前処理したDEAE-セルロースカラムで分別した。PTEは該カラムによって, 非吸着部("PTE I")と吸着部("PTE II")に分かれ, その大部分が前者の両分に回収された。"PTE I"画分に冷アセトンを60%濃度になるように加え, 得られた沈査な0.005M, pH6.8のリン酸緩衝液で透析したのち, 同緩衝液で前処理したCM-セルロースカラムに吸着させた。食塩の濃度を連続的に高めると, 該画分り成分はさらに4つの分画に分かれ, PTE活性は第4番目のピークにのみ見出された。この活性画分を再び同カラムで処理して, 遠沈上澄液に対し, 約362倍の比活性を示す酵素標品を得た。本標品はチゼリウス電気泳動および超遠心法による分析で, いずれも単一のピークを示した。なお, 純化酵素にはポリガラクトウロナーゼ, およびペクチンエステラーゼ活性は検出されなかったが, 痕跡程度のPATE活性が混在した。以上の分別および純化の一連の操作において, 組織の崩壊作用はつねにPTE活性画分に見出された。また, 2, 3の物理的性質(至適温度およびpH, 不活化温度およびpH)において, 組織崩壊作用とPTE活性の間に顕著な差異はなかった。したがって, 本菌株の組織崩壊作用はPTEにもとづくと判断され, プロトペクチナーゼ, マセレーション酵素あるいはphytolysinなどの存在は否定された。
- 日本植物病理学会の論文
- 1974-01-20
著者
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