In situ ハイブリダイゼーション法によるタバコモザイクウイルス-RNAのタバコプロトプラストにおける分布の観察
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概要
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タバコモザイクウイルス(TMV)感染タバコプロトプラストにおけるウイルスRNAの分布をIn situ ハイブリダイゼーション法を用いて検討した。核酸プローブとしては, TMVの外被蛋白質遺伝子のcDNAからT 7 RNAポリメラーゼによるIn vitro 転写系を用いて調製したジゴキシゲニン標識リボプローブを用いた。ジゴキシゲニン標識リボプローブの可視化はアルカリホスファターゼ標識ジゴキシゲニン抗体を用いた酵素組織化学あるいはFITC標識ジゴキシゲニン抗体を用いた蛍光抗体法によった。アンチセンスRNAプローブを用いた場合,シグナルは接種2時間後に細胞質で弱く観察され始め,その後,徐々に強くなり,接種12時間後で最も強く観察されたが,その後は徐々に弱くなった。センスRNAプローブを用いた場合もシグナルは,接種2時間後に細胞質で弱く観察され始め,接種12時間後で最も強くなったが,その後は徐々に弱くなった。しかし, このセンスRNAプローブのシグナルはアンチセンスRNAプローブのそれに比べかなり弱かった。両プローブとも核内には接種後のいずれの時期においてもシグナルは観察されなかった。これらの結果はTMV-RNAの合成部位が細胞質であることを示していると考えられた。
- 日本植物病理学会の論文
- 1994-12-25
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