(68)BNYVV P25タンパク質に相互作用する宿主因子の検索 : 酵母Two-hybridシステムを用いた試み
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概要
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Beet necrotic yellow vein virus(BNYVV)のP25遺伝子は,テンサイそう根病の病原性因子であるとともに,抵抗性植物では抵抗性反応を引き起こすエリシターとして機能する.このP25タンパク質と相互作用する宿主因子を探索するために酵母Two-hybridシステムを用いた.P25のORF領域をpGBKT7のGAL4 DNA結合ドメイン下流に挿入しpGBKT7-P25を構築した.Beta maritima MR2健全葉から抽出したpoly(A)RNAに対するcDNAはpGADT7-RecベクターのGAL4活性化ドメイン下流に宿主酵母の相互組換を用いクローニングした.このクローニング時にpGBKT7-P25を共に形質転換し,これをGAL4応答性の栄養レポーター遺伝子(HIS3,ADE2)の選択培地上でスクリーニングした.その結果,HIS3レポーターの栄養要求性による選抜で約700個のコロニーが得られ,さらにADE2レポーターにより約80コロニーが選抜された.そのうち40個がMEL1レポーターにより弱い陽性と考えられる淡い青色コロニーであった.現在この40クローンの解析を進めている.
- 日本植物病理学会の論文
- 2003-02-25
著者
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近藤 秀樹
岡山大資生研
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黒川 恵美
岡山大資生研
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玉田 哲男
岡山大資生研
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近藤 秀樹
岡大資生研
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桑名 賢
岡大資生研
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黒川 恵美
岡大資生研
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玉田 哲男
岡大資生研
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近藤 秀樹
岡山大学資源植物科学研究所 植物・微生物相互作用グループ
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