キャベツの葉肉プロトプラスト由来カルスの芽分化に及ぼす培養初期条件の影響

概要

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キャベツ葉肉プロトプラストからの植物体再分化の効率を高めるために,プロトプラストの分裂,カルス形成,芽分化に及ぼすホルモンの効果を検討した.そして,各段階における培地のホルモン組成が芽分化に及ぼす効果を明らかにした. 品種"ヤング"を,6x6×9cmのプラスチック容器中で無菌的に栽培し,2〜3cmの成熟葉からプロトプラストを得た.葉を約1mm幅に細断し,酵素液(0.1%ペクトリアーゼ,0-5%セルラーゼオノズカRS,0.5Mマンニトール,CPW塩)に入れ,25℃,60spmで往復振どうした.酵素処理45分後及び未分解葉片の30分酵素処理によりプロトプラストを得,CPW塩を含む0.5Mマンニトールでプロトプラストを洗った.1×105個/mlの密度で液体培地に懸濁し,20℃散光下(約1001ux)で培養した.培地はオーキツソとしてNAA又は2,4-D,サイトカイニンとしてカイネチンを含む改変MS培地(NH.NO.200mg/l以外は1/2濃度のMS無機塩,MSビタミン,1%ショ糖,0.5Mマンニトール)で培養した・培養1週間ごとに新しい培地を添加し,培養3週間目に各種ホルモン濃度の改変MS寒天培地上に流した.さらに1ヵ月後1〜2mmのカルスを異なった組成のMS培地に移植し,20℃,3.000luxで芽分化を促した.
日本育種学会の論文
1987-03-01