ラット歯周組織欠損の早期創傷治癒に及ぼすエナメルマトリックスデリバティブ(EMD)の影響(第486回大阪歯科学会例会抄録)

概要

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目的:歯周組織のtissue engineeringの一つであるエムドゲイン^<[○!R]>応用療法では,ブタ歯胚から抽出されたエナメルマトリックスデリバティブ(以下EMDと略す)が健全歯周組織中の幹細胞に働きかけ,歯周組織の再生を導<と考えられている.このような仮説をもとに,フラップ手術後の治癒に参画する細胞群に対するEMDの作用が解明されつつある.しかしEMDのin vitroにおける作用がin vivoにおいても同様の影響をもたらすのかについては,なお未解明な点が多い.そこで本研究では,ラット臼歯に外科的に作製した歯周組織欠損に対して,EMD塗布が早期治癒における歯と歯肉の付着状態にどのような影響を及ばすのかを明らかにするため,光顕的および電顕的に検討した,材料および方法:実験動物にはWistar系雄性ラット50匹を用い,その両側上顎第一臼歯□蓋側中央根および近心根を実験部位とした.手術は,口蓋側の全層弁を形成後,ラウンドバーを用いて歯槽骨、歯根膜および歯根面を削除した.その後,両側の削除根面にEMDを塗布したラットを実験群とレー方,両側の削除根面にEMDを塗布しなかったラットを対照群とした.手術後1,3,5,7および14日に,両群とも5匹ずつ安楽死させた.続いて,被験歯を含む周囲組織を一塊として採取した.採取した試料は固定,脱灰後,右側の試料は通法に従ってパラフィン包埋し,H・E染色を施して光顕的に観察した.なお,実験群14日の試料については,TRAP染色を行った.一方,左側の試料は形通リにエポン包埋後,準超薄切片を作製,H・E染色標本と対比した.その後,超薄切片を作製して,透過型電顕にて観察した.結果および考察:(光顕所見)対照群1日の歯周組織創傷部では,多量の出血と散在する好中球がみられた.一方,実験群1日の歯周損傷部では, EMDはわずかに好酸性の不定形物,あるいはフィプリンと混在した微好酸性の網目状構造物として認められた.また,EMD周囲には著しい好中球の集簇がみられ,EMDを加水分解しているものと考えられた.3日後では,両群とも,好中球に代わってマクロファージの出現がみられ,その数は実験群で顕著であった.その後,対照群では,フィブリンの吸収とともにコラーゲン線維形成が進行した.実験群においても,EMDの吸収とともにコラーゲン線維形成がみられ,さらに根面付近では,対照群に比べ高いcellularityが認められた.また,今回観察した実験群14日の全ての試料で,TRAP陽性細胞による根吸収像が観察された.(電顕所見)対照群1日, 3日の根面にはフィブリンが付着していた.一方,実験群1日,3日の根面には,血漿蛋白やフィブリンと混在したelectron-denseなEMDが付着していた.その後,両群とも,マクロファージとともに線維芽細胞が出現した.7日,14日後になると,対照群では,細長い線維芽細胞が根面と平行に配列していた.実験群では,根面に隣接して多くのマクロファージと線維芽細胞の混在する領域が認められた.また,実験群14日では,根面に接して多核巨細飽か観察された.以上の結果よリ,EMD塗布根面では,治癒早期にマクロファージが多く出現し,それらが線維芽細胞の増殖や破歯細胞の出現に重要な役割を果たしているものと考えられた.
大阪歯科学会の論文
2003-03-25

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