3方法で固定した Prevotella intermedia 細胞表層構造の画像処理
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概要
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口腔感染症の発症と進展に深く関与している P. intermedia ATCC 25611 (P.i 25611)とATCC 33563 (P.i 33563)および P. gingivalis 381 (P.g 381)細胞表層構造に及ぼす固定の影響を電子顕微鏡で観察し, デジタル画像解析処理装置ルーゼックスを用い, 測定部位を二値化後計測した. また, 周期構造はフーリエ変換後のパワースペクトルの高周波成分の検出で確認した. 固定法は二重固定法(化学固定), Kellenberger-Ryter法(化学固定, KR)および凍結置換法(物理固定, FS)を使用した. 二重固定法で固定したP.i 25611細胞表層構造の幅は, 細胞質側からそれぞれ細胞膜13.0, その内葉4.6, 中層2.7, 外葉3.6, ぺリプラズム間隙2.1, ペプチドグリカン層(PG層)6.2, ぺリプラズム間隙17.2, 外膜9.2, その内葉2.7, 中層3.1, 外葉3.1nmであった. 凍結置換法ではPC層はみられず, 細胞膜11.9, その内葉3.8, 中層4.4, 外葉3.3, ぺリプラズム間隙8.6, 外膜11.0, その内葉3.1, 中層3.7, 外葉3.7nmであった. ぺリプラズム間隙の幅は物理固定より, 化学固定で大きかった. ぺリプラズム間隙をフーリェ変換後さらに逆フーリエ変換すると, いずれの固定法ともにねじれ構造が認められた. その構造は物理固定より化学固定で多い傾向を示した. 化学固定試料の走査電子顕微鏡所見でみられる細胞表層の粒子構造をフーリエ変換して周期構造を解析したところ, 周期性はみられなかった. 細胞膜と外膜の幅はデジタル画像計測法では, 固定法によって差異はみられなかったが, ノギスで測定すると, KRが他の二方法より小さかった. 化学固定でPG層が観察されたとき, ぺリプラズム間隙の幅は外膜側で大きくなっていた. 以上の事実は, デジタル画像解析処理装置を用いて P. intermedia細胞の表層構造を詳細に計測し, 周期構造を解析すると, 固定法の影響はPG層とぺリプラズム間隙に出現しやすいことを示唆している.
- 1995-06-25
著者
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