好気性,グラム陽性,カタラーゼ陽性球菌の迅速同定キットの開発 : Microplate hybridizationによる全被検菌株の予備同定を踏まえて

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概要

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• グラム陽性,カタラーゼ陽性好気性球菌の迅速同定キット「スタフィオグラム」(テルモ)のプレート作製,追加試験選定およびコードブック編集のための基礎実験を行った。この目的のためStaphylococcus aureusを含むMicrococcaceaeの3属30菌種の基準株のそれぞれが固有のコード番号を示すスタフィオグラムプレートを作製した。このプレートは10種の糖分解試験と8種の酵素活性試験から成り,McFarland No.4の菌液50μlを各ウェルに分注し,37C, 4時間培養後に結果を判定する。このプレートを用いて新鮮分離株の同定を試みるに先立ち,好気性グラム陽性球菌同定へのfluorometric microplate hybridizationの有用性を確認した上で,新鮮分離386株のすべてを核酸同定した。これらの菌株をスタフィオグラムプレートで培養すると,得られたコード番号236種類のうち218種(92.4%)はStaphylococcus属15菌種とStomatococcus mucilaginosusに固有の番号であった。被検386株のうち,これらの番号のいずれかに該当した342株(88.6%)は追加試験を行うことなく同定できた。同定できたStaphylococcus属15菌種のうちApproved lists of bacterial namesに収録されているもの(すなわち1980年1月1日以前の正式発表名)が11菌種を占め,その後に提案された菌種と同定されたのはS. caprae, S. lugdunensis, S. gallinarumおよびS. delphiniの4菌種に過ぎず,残りの8菌種に該当する株はなかった。しかしS. caprae(48株),S.haemolyticus(46株),S. capitis(35株)はS. epidermidis(67株)に次いで株数が多くS. saprophyticus(31株)より上位にあった。236種類のコード番号のうち2菌種に重複したのは7種類(27菌株),4菌種に重複したのは1種類(17菌株)の計8種類(3.4%)であった。コード番号が重複した44菌株は追加試験として選択した8項目のうち1∼3項目を実施することでmicroplate hybridizationの同定結果を追認し得た。以上の結果からスタフィオグラムはStaphylococcus, Micrococcus, Stomatococcusの各属の菌種の迅速同定キットとして有用であると確信した。今後核酸同定した菌株によるデータを集積して専用コードブックを作製し,同定精度の高いキットを完成させたい。

• 日本細菌学会の論文

著者

• 河村 好章

  岐阜大学医学部微生物学

• 藪内 英子

  岐阜大学医学部微生物バイオインフォマティクス

• 藪内 英子

  岐阜大学医学部微生物学講座

• 河村 好章

  岐阜大学医学部微生物学講座

• 河村 好章

  岐阜大学大学院医学研究科再生医科学専攻再生分子統御学講座 微生物・バイオインフォマティックス部門

• 重松 貴

  テルモ株式会社研究開発センター医薬品部

• 江崎 孝行

  岐阜大学医学部

• 河村 好章

  愛知学院大学薬学部医療薬学科微生物学講座

• 長瀬 弘司

  テルモ株式会社技術開発本部診断開発部門

• 遠藤 正和

  テルモ株式会社技術開発本部診断開発部門

• 重松 貴

  テルモ株式会社技術開発本部診断開発部門

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