イネ品種銀坊主に適した高効率アグロバクテリウム形質転換系の開発

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農業上重要な遺伝子を同定するための相補性検定において,形質転換効率の改善は重要である.しかしながら,アグロバクテリウムを介したイネ形質転換効率において大きな品種間差異が存在する.銀坊主には,非常に活性化された転移因子mPingが内在しており,価値の高い研究材料である.我々は,mPing SCARマーカーおよびmPingタギングシステムを利用し,銀坊主に誘発された突然変異遺伝子を同定することに成功してきた.しかしながら,銀坊主の非常に低い形質転換効率は,候補遺伝子の相補性検定および機能解析の妨げとなっている.本報では,銀坊主に適した効果的なアグロバクテリウム形質変換法を報告する.銀坊主は,アグロバクテリウム感染に対する耐性が極めて弱く,アグロバクテリウムとの共存培養後に活性のあるカルスを再生することが困難であった.これを克服するために,感染には非常に低濃度のアグロバクテリウムを,一次スクリーニングでは高濃度のメロペンを使用した.また,共存培養時に感染したカルスを紙タオルで水分を拭き取って乾燥した状態を保つことも重要であった.その結果,一度に十分量の形質転換体を獲得することが可能となった.形質転換効率は14.3%であり,再生効率は90%以上であった.

イネ品種銀坊主に適した高効率アグロバクテリウム形質転換系の開発

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