α-chlorohydrin 暴露したラット精巣上体精子の運動性および先体反応の評価
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概要
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Rat cauda epididymal spermatozoa treated with α-chlorohydrin at concentrations of 0, 0.01, 0.1, and 1.0 under conditions that support in vitro fertilization were used to evaluate the effects of acrosomal status and sperm motility in predicting their fertilizing capacity. Acrosomal status was assessed by fluorescein isothiocyanate-conjugated concanavalin A (FITC-ConA) lectin assay in combination with supravital stain using calcein acetoxy methyl ester (CAM) and ethidium homodimer-1 (EthD-1) at 1, 3, and 5 h of incubation. Sperm motility was also examined with a computer assisted sperm analysis (CASA) system at the same time points as acrosomal status. The movement of spermatozoa treated with α-chlorohydrin at 0.01 mM was similar to the control spermatozoa over 5 h of incubation. The 0.1 mM treated spermatozoa showed progressive movement at 1 h of incubation, and low vigorous movement was seen after 3 h of incubation. The 1.0 mM treated spermatozoa showed low progression and low vigorous movement over 5 h of incubation. The FITC-ConA patterns of rat spermatozoa undergoing acrosome reaction were marked by the appearance of bright green fluorescence from the acrosomal region on their head, and were clearly distinguished from the degenerative acrosome loss in dead sperm. A time-related increase in the percentage of live acrosome lost sperm was observed in the control and 0.01 mM α-chlorohydrin treated groups, but a low percentage and no time-related increase in live acrosome lost sperm without degenerative acrosome loss in dead sperm were observed in the 0.1 and 1.0 mM treated groups. On the basis of these results, rat spermatozoa labeled with FITC-ConA combined with CAM and EthD-1 can have their acrosomal status clearly distinguished. The α-chlorohydrin treated spermatozoa were suppressed not only vigorous movement but also acrosome reaction, and the results suggested that the present staining procedure for acrosomal status can be a useful indicator for predicting spermatozoal fertilizing capacity.
- 日本繁殖生物学会の論文
- 2002-10-01
著者
-
平野 和行
Gifu Pharmaceutical University
-
平野 和行
岐阜薬科大
-
長村 洋一
藤田保健衛生大衛生臨化
-
平野 和行
岐阜薬科大学
-
平野 和行
Laboratory Of Pharmaceutics Gifu Pharmaceutical University
-
平野 和行
岐阜薬科大学 薬剤学
-
長村 洋一
藤田保健衛生大学衛生学部臨床化学教室
-
長村 洋一
藤田保健衛生大学
-
長村 洋一
藤田保健衛生大学病院 臨床検査部
-
平野 和行
岐阜薬大・薬剤学
-
木村 均
名城大学 薬・薬理
-
平野 和行
岐阜薬科大学薬剤学研究室
-
木村 均
株式会社日本バイオリサーチセンター羽島研究所
-
古橋 忠和
株式会社日本バイオリサーチセンター
-
加藤 真之
株式会社日本バイオリサーチセンター
-
牧野 幸子
株式会社日本バイオリサーチセンター 試験管理部
-
太田 隆雄
株式会社日本バイオリサーチセンター 試験管理部
-
加藤 真之
株式会社日本バイオリサーチセンター 試験管理部
-
古橋 忠和
株式会社日本バイオリサーチセンター 試験管理部
-
平野 和行
岐阜薬科大学 薬剤学教室
-
長村 洋一
藤田保健衛生大学 衛生学部 臨床化学研究室
-
Hirano Kazuyuki
Radioisotope Laboratory And Department Of Pharmaceutics Gifu Pharmaceutical University
-
木村 均
株式会社日本バイオリサーチセンター 試験管理部
-
Hirano Kazuyuki
Department Of Pharmaceutcs Gifu Pharmaceutical University
-
Kizu Hiroto
Department Of Radiology Kanazawa University Hospital
-
Kizu Hiroto
Laboratory Of Pharmaceutics Gifu Pharmaceutical University
-
木村 均
株式会社日本バイオリサーチセンター
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