Agrobacterium tumefaciensによるOdontoglossum ringspot virus外皮タンパク質遺伝子導入玉花ランの作出
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概要
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Odontoglossum ringspot virus (ORSV)外皮タンパク質(CP)遺伝子をウイルスに感染したEpidendrumからクローニングし,green fluorescence protein (GFP)遺伝子およびハイグロマイシン抵抗性(Hyg^r)遺伝子をプラスミドベクターpGreenIIに組み込み,植物発現ベクターpHPUNOJ_E-1を構築した.プラスミドpHPUNOJ_E-1ベクターをAgrobacterium tumefaciens LBA 4404に導入し,玉花ラン(Cymbidium niveo-marginatum)ライゾームと共存培養した.その結果,ハイグロマイシンセレクション136個のライゾーム中81個の生存を確認した.生存したライゾームから227個のシュートが発生し,その中で215個の生存を確認した.64%の生存したライゾームおよび39%の生存したシュートからGFP蛍光が観察された.GFP蛍光が観察されたシュートからpolymerase chain reaction (PCR)法でORSV CP,GFP,Hyg^r遺伝子を検出した.ORSV CPはenzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)で確認した.
- 2006-05-15
著者
-
新美 善行
広島県立大学生物資源学部
-
奥 尚
県立広島大生命環境
-
陳 莉
Department Of Endocrine Qilu Hospital Shandong University
-
Chen L
Laboratory For Stem Cell Research Aalborg University
-
陳 莉
広島県立大学生物資源学部
-
河合 仁美
広島県立大学生物資源学部
-
奥 尚
広島県立大学生物資源学部
-
高橋 智佐子
向島洋ランセンター
-
陳 莉
広島県立大院生物生産システム研究科
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