ラット桑実胚の高濃度糖アルコール液によるガラス化保存に関する研究

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ガラス化液に使われる凍害保護物質の細胞毒性,ガラス化のし易さ,ガラス化状態の安定性を評価して,ガラス化液の特性とラット桑実胚のガラス化保存能との関係を調べた.Glycerol(GI)は5分間の室温処理では50%の濃度まで胚の生存性に影響を与えなかったが,50%濃度のpropandiol(Pd)やbutandiol(Bd)は1分の処置により致命的な影響を与えた.しかし,これら凍害保護物質の25%液に25%Glを加えた混合液では5分の処置でも胚の障害は見られなかった.室温で処理した胚のガラス化保存では,40%および50%のGlを含む液でガラス化保存した場合,76%および88%が生存していたが,PdおよびBdを用いた場合はいずれの濃度でも生存胚はみられなかった.しかし,25%のPdや25%Bdに25%Glを混合したガラス化液では,それぞれ75%と69%の胚が生存していた.さらに,細胞非透過性の5%percollあるいはpolyvinylpyroridoneを添加した場合,胚の生存性が改善された.ガラス化液の濃度とガラス化能との関係から,Pd>Bd>Glの順にガラス化し易いこと,ガラス化液の脱ガラス化温度から,Pd>Gl>Bdの順にガラス化の安定性が高いことが認められた.以上の成績から,胚のガラス化は簡易性およびガラス化状態の安定性などから,高濃度のPdやBdは毒性が高いので,それらを細胞毒性の少ないGlとの混合液が有効であることが示唆された.
日本繁殖生物学会の論文

ラット桑実胚の高濃度糖アルコール液によるガラス化保存に関する研究

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