ウシ体外受精由来胚盤胞の凍結能についての特性
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概要
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体外受精後,家兎卵管内培養と体外培養で得られた胚盤胞の耐凍性を比較し,さらに体外培養で得られた胚盤胞の冷却速度および液体窒素(以下LN<SUB>2</SUB>とする)中への浸漬温度が胚の凍結,融解後の生存性に及ぼす影響について検討した.凍結基礎媒液には33%子牛血清を含むリンゲル氏液,凍結保護物質には1.4Mグリセロールを用いた.凍結•融解後の培養24時間までに胞胚腔の回復した形態的に正常な胚盤胞を生存胚とした.また,培養48時間後に脱出胚盤胞に発生した胚の割合を発生率とした.<BR>植氷後,0.3C/分で冷却した場合,家兎卵管内培養胚盤胞は-24~-39Cの広いLN<SUB>2</SUB>浸漬温度で高い生存率を示したが,体外培養胚盤胞は-30Cのみで高い生存率を示した.<BR>体外培養胚盤胞は,冷却速度を0.3C/分とするとLN<SUB>2</SUB>浸漬温度-30C区で,0.5C/分とすると-33Cと-36C区で高い生存率と発生率が得られた.<BR>脱水に対する抵抗性を検討するために0.3C/分で冷却して各温度から加温した場合に,過度の脱水による傷害(溶液効果)は-45Cになると発生率の有意な低下として示された.<BR>以上から,体外受精後の培養条件によって胚の品質が異なり,それが胚の耐凍性に関係することが明らかにされた.体外受精胚盤胞でも家兎卵管内培養胚盤胞の耐凍性は高いことが示された.しかし,本法で得られる体外受精•体外培養胚盤胞は,凍結過程での溶液効果や融解過程での浸透圧障害に対する物理化学的抵抗性が低いため,厳密な凍結条件を適用する必要がある.
- 日本繁殖生物学会の論文
著者
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内海 恭三
京都大学農学部
-
福島 護之
兵庫県立中央農業技術センター
-
秦谷 豊
兵庫県立中央農業技術センター
-
福島 護之
兵庫県立北部農業技術センター 畜産部
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冨永 敬一郎
兵庫県立中央農業技術センター
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