体外受精に由来するマウス2細胞期胚の凍結保存と融解後の移植成績について
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概要
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PMSGとHCGにより過排卵を誘起したF1(C3H/He×C57BL/6Jat-at)成熟雌の卵管膨大部よりHCG投与後15〜16時間に採取した卵子と,JCL:ICR系成熟雄の精巣上体尾部より採取し1時間前培養した精子を用いて体外受精を行ない,精子添加後6時間に第2極体を有する受精卵をさらに22時間培養し,2細胞期へ発生した胚を凍結保存実験に供した,10〜30個の2細胞期胚をプラスチック製小試験管(12.5×70mm)に移し,0°Cで最終濃度が1MになるようにDMSOを2分間隔で2回に分けて添加した.10分間の平衡後-5°Cで植永を行ない,-70°Cまで,3〜0.5°C/分の速度で冷却後,液体窒素中に移し1〜7日間保存した.融解(6〜10°C/分)は室温空気中で行ない形態的に正常と認められた胚を48時間培養し,偽妊娠3日目(膣栓確認日=偽妊娠第1日)の雌の子宮へ移植した.90〜94%の胚が融解直後に形態的に正常な胚と判定され,48時間の培養により82〜94%の胚が桑実胚あるいは初期胚盤胞へ発生した.これらの桑実胚または初期胚盤胞153個を15匹の雌へ移植した結果,7匹の雌から19匹(雄11匹,雌8匹)の新生子が得られ,性成熟後のきょうだい交配により正常な繁殖能力を有することが確かめられた.
- 社団法人 日本畜産学会の論文
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