ブリーチング法を利用したエナメル質表層下脱灰病巣の再石灰化戦略 : 第1報 30%過酸化水素水による唾液成分タンパク質の化学的変化

概要

論文の詳細を見る
唾液中の高分子成分は,エナメル質表層下脱灰病巣内に侵入し,ハイドロキシアパタイト結晶表面に吸着しているといわれており,次亜塩素酸溶液を使用することにより,エナメル質病巣内の唾液タンパク質が除去され,アパタイトの結晶成長が促進されるという報告がある.一方,オフィスブリーチング材は20〜35%のH_2O_2を含有しており,これが有色成分を変性もしくは分解することで漂白作用を示す.われわれは,オフィスブリーチング材のエナメル質病巣内の高分子を変性させるという機能を治療的に利用することで再石灰化を促進することが可能であるという仮説を立てた.本研究ではヒト唾液タンパク質に30%H_2O_2を作用させ,それらの化学的変性について検討した.4℃, 10,000rpmにて30分遠心した自己安静時唾液上清に氷冷イソプロパノールを終濃度70vol%になるように加えて約3時間静置後,4℃, 7,000rpmにて10分間遠心分離した.回収した沈澱を以下に示す2群に分けて処理を行った.1)過酸化水素水群(H_2O_2群):沈澱に対し30%過酸化水素水を加え,30分間室温にて反応させ,再度イソプロパノールを加え上記と同様の条件にて遠心分離し,上清と沈澱を回収した.2)コントロール群(DW群):沈澱に対し脱イオン水(DW)を加え30分間室温に静置し,1)と同様に遠心分離し,上清と沈澱を回収した.1)と2)の画分をSDS sample bufferに溶解し,94℃, 5分熱変性処理後,SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)にて分析を行った.ゲルはCBBおよびStains-All染色を行ったほかに,Western blottingにてタンパク質のタンパク化学的性状変化を検討した.SDS-PAGEの結果から,30%H_2O_2処理で特定のタンパク質が不可逆的に酸化され,分子量が変化することが判明した.さらに,albuminやstatherinの抗体を使用したWestern blottingの結果から,著しく特異的に変化をするバンドも認められた.すなわち,30%H_2O_2処理によりalbumin抗体は幅広い分子量で検出されたと同時にstatherin抗体の反応が消失した.以上の結果から,安静時唾液に含まれる唾液タンパク質は30%H_2O_2の作用により,断片化あるいは新たな結合による集合体を形成することが示された.なかでも,statherinの変性は石灰化抑制力の喪失を意味していると考えられ,オフィスブリーチング材を用いたエナメル質表層下脱灰病巣の再石灰化治療の可能性が示唆された.
2012-04-30

ブリーチング法を利用したエナメル質表層下脱灰病巣の再石灰化戦略 : 第1報 30%過酸化水素水による唾液成分タンパク質の化学的変化

スポンサーリンク

概要

著者

関連論文

スポンサーリンク