コラーゲンビトリゲル薄膜担体上で培養した初代肝細胞およびES細胞の凍結保存
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概要
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We introduce a novel technology to cryopreserve cells directly in monolayer utilizing a collagen vitrigel membrane as a scaffold. The membrane has excellent mechanical strength and can be easily handled by tweezers even after culturing cells on it. In this study, we used the membrane for direct preservation of primary hepatocytes, feeder cells, and ES cells. Freshly isolated hepatocytes (4x10^5 cells), mitomycin C treated mouse fibroblasts (feeder cells) or mouse embryonic stem (ES) cells were inoculated and cultured on a collagen vitrigel membrane (35mm in diameter) in a culture dish for 24hr to form colonies in monolayer. The cell colony-spread scaffold was transferred to a new dish with fresh preservation medium containing 10%DMSO. The dish was then gradually frozen to -80℃ and stored in liquid nitrogen for 1 week to 3 months. The cell adhesiveness and viability before and after cryopreservation were evaluated by cell morphology and calcein staining, respectively. The cells preserved by this method showed significant improvement compared to cells preserved without the collagen vitrigel membrane.
- 低温生物工学会の論文
- 2010-03-15
著者
-
竹澤 俊明
農業生物資源研究所遺伝子組換え家畜研究センター
-
竹内 朋代
農業生物資源研究所遺伝子組換え家畜研究センター
-
絵野沢 伸
国立成育医療セ 研
-
絵野沢 伸
千葉大学 小児外科
-
絵野沢 伸
国立小児病院小児医療研究センター実験外科生体工学科
-
竹澤 俊明
農業生物資源研
-
宮本 義孝
名古屋大学先端医療バイオロボティクス学
-
宮本 義孝
名古屋大学
-
竹澤 俊明
生物研池の台(動物細胞機能研究チーム)
-
絵野沢 伸
国立成育医療セ
-
絵野沢 伸
国立成育医療センター移植・外科研究部
-
宮本 義孝
国立成育医療センター研究所移植外科研究部:農業生物資源研究所遺伝子組換え家畜研究センター
-
宮本 義孝
名古屋大学医学研究科先端医療バイオロボティクス学
-
絵野沢 伸
国立生育医療研究センター先端医療開発室
-
宮本 義孝
国立成育医療研究センター
-
竹澤 俊明
独立行政法人農業生物資源研究所
-
宮本 義孝
国立成育医療センター
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