39. アドレノドキシン、アドレノドキシン還元酵素の副腎内局在の電顕酵素抗体法による観察

概要

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副腎におけるステロイドホルモンの生合成には、チトクロームP_<450>、アドレノドキシン(Ad)及びその還元酵素(Ad-R)から成る複合酵素系が関与し、生化学的検索では、ミトコンドリアに存在する。我々は、先に、日本生化学会(三谷ら、1977年10月)において、牛副腎のAd及びAd-Rを軟質パラフィン切片を用いた酵素抗体法による組織内分布(zonal distribution)について報告したが、今回、我々はさらに電顕での細胞内局在の観察を行った。牛副腎よりAd, Ad-Rを精製し、それを用いて、抗牛副腎AdおよびAd-R家兎抗体(Fab')を作製、次いで、これにベルオキシダーゼを標識した。牛副腎を摘出後、被膜から髄質までたんざく状とし(光顕用)、さらに各層を別々に細切し、電顕観察用とした。また、超遠心で得た束状-網状層のミトコンドリアとミクロゾーム分画をMcleanらのPLP固定液で固定、洗浄、6μ凍結切片とし、直接法により抗原抗体反応を行った。Ad, Ad-Rいずれも光顕では束状層と網状層の実質細胞の細胞質のびまん性に染色され、電顕では、それらのミトコンドリアの内膜に局在し、生化学的知見とよく合致した。
日本組織細胞化学会の論文
1978-11-01