Expression, Purification, and Characterization of 2'-Aminobiphenyl-2,3-diol 1,2-dioxygenase from Carbazole-degrader Pseudomonas resinovorans Strain CA10(Microbiology & Fermentation Technology)
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概要
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The two-subunit meta-cleavage enzyme, 2'-aminobiphenyl-2, 3-diol 1, 2-dioxygenase (CarBaBb), from the carbazole degrader Pseudomonas resinovorans strain CA10 was purified to homogeneity from an Escherichia coli strain carrying the expression vector pUCA503, in which two copies of the carBaBb genes are tandemly linked. SDS-PAGE and gel filtration showed that CarB was a α_2β_2-heterotetrameric enzyme with subunit molecular masses of approximately 10,000 for CarBa and 29,000 for CarBb. The optimum pH for activity was 8.5 and that of temperature was 35℃. The CarB enzyme had a K_m of 14μM and a k_<cat>/K_m of 0.25μM^<-1> s^<-1> for 2'-aminobiphenyl-2, 3-diol, and the catalytic activities for biphenyl-type catecholic substrates were higher than those for monoaromatic catechol derivatives. The enzyme was originally isolated as a mefa-cleavage enzyme for 2'-aminobiphenyl-2, 3-diol involved in carbazole degradation, but the enzyme was highly specific for 2, 3-dihydroxybiphenyl.
- 社団法人日本農芸化学会の論文
- 2003-02-23
著者
-
清水 謙多郎
東大院・農生科・応生工
-
Yoshida Toshiomi
大阪大学生物工学国際交流センター
-
Yoshida T
International Center For Biotechnology Osaka University
-
NOJIRI Hideaki
Biotechnology Research Center, The University of Tokyo
-
OMORI TOSHIO
Biotechnology Research Center, The University of Tokyo
-
Shimizu Kentaro
Department Of Biotechnology Graduate School Of Agricultural And Life Sciences The University Of Toky
-
Omori T
Coll. Of Systems Engineering And Sci. Dep. Of Bioscience And Engineering Shibaura Inst. Of Technol.
-
IWATA KENICHI
Biotechnology Research Center, The University of Tokyo
-
HABE HIROSHI
Biotechnology Research Center, The University of Tokyo
-
YOSHIDA Takako
Biotechnology Research Center, The University of Tokyo
-
Omori Toshio
Biotechnoiogy Researchcenter The University Of Tokyo
-
Iwata Keiko
Laboratory Of Molecular And Cellular Biology Department Of Life Science Faculty Of Bioresources Mie
-
Iwata K
Biotechnology Research Center The University Of Tokyo
-
Nojiri H
Biotechnology Res. Center The Univ. Of Tokyo
-
Noguchi Haruko
Biotechnology Research Center The University Of Tokyo
-
Nojiri Hideaki
Biotechnology Res. Center The Univ. Of Tokyo
-
Yoshida T
Kinki Univ. Nara Jpn
-
Habe Hiroshi
Biotechnology Research Center University Of Tokyo
-
Habe H
Research Institute For Innovations In Sustainable Chemistry National Institute Of Advanced Industria
-
Shimizu Kentaro
Department Of Biotechnolgy Graduate School Of Agricultural And Life Science The University Of Tokyo
-
吉田 豊和
岐阜大 工
-
Omori Toshio
Shibaura Institute Of Technology
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