A method for the peak identification of uric acid appeared in a liquid chromatogram using uricas
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概要
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A method for the peak identification of uric acid appeared in a liquid chromatogram using uricase has been developed. Uricase catalyzes the conversion of uric acid to allantoin. It has been found that allantoin cannot be oxidized under the present chromatographic conditions to form its liquid chromatographic peak in a chromatogram. If a uric acid peak appeared in a chromatogram of a biological sample did not contain any other electroactive materials, the urate peak should be completely disappeared in a chromatogram of the sample after the uricase treatment. Eluate from a column was amperometrically monitored by aid of an electrochemical detector. We found that the previously observed urate peak in a chromatogram of a biological sample was completely disappeared in a chromatogram of the sample after the uricase treatment. This finding strongly suggests that when eluate from a column is amperometrically monitored, a uric acid peak does not contain any other electroactive components in a chromatogram obtained under the present chromatographic conditions. In addition, eluate from the column was spectrophotometrically monitored by aid of an ultraviolet absorption detector. The spectrophotometric detection method is less selective and lower sensitivity compared with the electrochemical detection method. In addition, the molar absorption coefficiency of allantoin is very small compared with that of uric acid. After the uricase treatment of a biological sample containing uric acid, allantoin does not form its peak in a chromatogram monitored by the ultraviolet absorption detector. We found that when eluate from the column was amperometrically monitored, some liquid chromatographic peaks identified as uric acid contained any other electroactive components for some cases after the uricase treatment. This finding seems to suggest that the uricase peak - disappearance reaction method developed in this study is feasible for checking the purity of uric acid peaks, especially when eluate from the column was monitored by aid of the ultraviolet absorption detector. After the completion of this study, we have emphasized again that the electrochemical detector for high - performance liquid chromatography is a powerful tool for studies of uric acid in various biological samples such as body fluids and mammalian tissues in relation to some diseases because of its high sensitivity and selectivity.
- Japanese Society of Gout and Nucleic Acid Metabolismの論文
著者
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栗原 敏
東京慈恵会医科大学
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富沢 直子
東京慈恵会医科大学第二生理学教室
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入山 啓治
東京慈恵会医大 Dna医研
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吉浦 昌彦
東京慈恵会医大 医科研
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岩本 武夫
東京慈恵会医科大学共同利用研究施設
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栗原 敏
東京慈恵会医科大学第二生理学教室
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