ネーブルオレンジ珠心細胞に導入された遺伝子の液体チッソによる保存下での安定的な保持
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概要
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エレクトロポレーション法により得られたネーブルオレンジの形質転換細胞は, ガラス化法によって安全に液体チッソ中で保存できた。ガラス化液 (PVS2)で25°C, 3分間処理した形質転換細胞を1剤8ml容のクライオチューブに移し, 直ちに液体チッソ中に投入した剤1年間液体チッソ中で保存した細胞の生存率を二酢酸フル才レセインとフェノサフラニンの二重染色により調べた結果, 生存率は約90%であった. サザン分析の結果は, 導入されたネオマイシンフォスフォトランスフェラーゼII (NPTII) 遺伝子が液体チッソ中で保存した細胞に安定に保持されていることを示した. DNAの変異は生じていなかった. 保存した細胞から再生された植物体と保存しなかった細胞から再生された植物体との問でも形態的な差は認められなかった.
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