15. L-乾燥保存におけるプラスミドの保持安定性(昭和61年度第32回凍結及び乾燥研究会研究報告)
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概要
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宿主菌に導入されたプラスミドpBR322, pSC138およびF'102についてL-乾燥保存における保持安定性を検討した.3%MSG添加リン酸緩衝液を分散媒に用いて乾燥した時,乾燥直後ではいずれのプラスミドも安定に保持されていたが,37℃での苛酷保存試験をおこない,生残率が0.1%以下に低下した乾燥標品においてはpBR322およびpSC138の場合はそれぞれ0.5%の,F'102の場合は5.5%の頻度でプラスミドの脱落した生残菌が検出された.この37℃保存による生残率の低下およびプラスミドの脱落は,保護剤としてチオ尿素,アドニトールあるいはシステインを分散媒に添加することで防止された.乾燥標品から抽出したプラスミドDNAをアガロースゲル電気泳動法によって分析したところ,37℃で保存した標品では閉環プラスミドDNAの減少および開環プラスミドDNAの増加等の変性が認められた.このプラスミドDNAの変性はチオ尿素等の保護剤を添加することで軽減された.またこのプラスミドDNA障害は,乾燥細胞を復水したあと37℃で90分間保温する間にその障害の大部分が修復された.
- 1986-08-30
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