生物学的試料におけるグリコサミノグリカン(GAG)量の異なった定量法による比較分析

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グリコサミノグリカン(GAG)は歯周組織の炎症や歯槽骨の吸収,再生などの代謝活性が上昇したときに,歯肉溝滲出液中に増加することが知られており,歯周病変活性のマーカーとしての可能性が示唆されている。しかし,用いた分析法によって溶出液GAG量が異なるため混乱が生じている。本研究は生物学的試料として歯肉ホモジネート上清液,関節液,カラゲニンからの滲出液の三種類を用い,GAGとGAG-プロテオグリカン(PG)を三方法の定量分析によって比較したものである。抽出したGAGは電気泳動法によりセルロースアセテート膜上で分離を行い,アルシアンブルーで染色を行った。染色された部分はデンシトメーターにより評価した。抽出したGAGからコンドロイチナーゼ消化を行ったコンドロイチン硫酸の不飽和二糖は,高速液体クロマトグラフィー(HPLC法)で定量を行った。一方,少量のGAG-PGはモノクローナル抗体と特定の酵素消化を組み合わせたELISA法で定量を行った。その結果,電気泳動法とHPLC法ではGAGのレベルは近似していたが,ELISA法によるGAG-PGのレベルは前二者と比較して3〜80倍を示した。また,生化学的手法によってデルマタン硫酸は関節液と嚢胞液において検出されなかった。このことは,ELISA法によって得られたGAG-PG値は生化学的手法で得られたGAG値とは著明に異なり,ELISA法は生化学的方法の代用に必ずしもならないことを示している。これらの結果は,GAGの分析方法を選択するのに役立ち,また,生物学的試料を異なった定量法で得た結果を考察する上での一助となることを示唆している。
特定非営利活動法人日本歯周病学会の論文
1998-09-28

生物学的試料におけるグリコサミノグリカン(GAG)量の異なった定量法による比較分析

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