種々のドナー細胞由来トランスジェニック体細胞核移植胚の発育能
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概要
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今回の研究は牛のトランスジェニック体細胞核移植(SCNT)胚の効果的な作出システムを確立するために行われた.トランスジェニックSCNT胚の発育能に及ぼすドナー細胞の種類,サイズ,継代数の影響をマーカー遺伝子の発現率によって調べた.PcDNA3プラスミッドヘの牛βカロチンプロモーター,GFPマーカー遺伝子と人プロウロキナーゼターゲット遺伝子の導入によって人プロウロキナーゼに対する発現プラスミッドを構築した.牛体細胞としては卵丘細胞と耳由来繊維芽細胞および胎子由来繊維芽細胞を用い,キヤリアーとしてリポソームトランスフェクション試薬,Fugene6を用いた.実験1では3種類の2〜4回継代牛培養細胞を用いて行った.GFP発現細胞を無作為に選んでSCNTに用いた.卵丘細胞で再構築したSCNT胚の発育能とGFP発現率は他の細胞に比べて有意に高かった.3種の細胞すべてでSCNT胚のGFP発現率は胚の発育経過に伴って次第に減少した.実験2では卵丘細胞の継代数が2〜4回あるいは8〜12回の場合の影響を調べたところ,トランスジェニックSCNT胚の発育には有意な差は認められなかったが,2〜4回の継代細胞でのGFP発現率は有意に高かった.実験3では2〜4回のGFP発現継代卵丘細胞のうち,大きな細胞および小さな細胞をSCNTに用いたところ,胚の発育とGFP発現は小さな細胞で有意に改善された.これらの結果,(1)胎子由来細胞と同様に成熟体細胞をトランスジェニックSCNT胚生産におけるドナー細胞として用いることができ,継代数の少ない小さな卵丘細胞が最適の細胞であり,(2)成熟体細胞由来のトランスジェニックSCNT胚は発育能を有していることが観察された.
- 2004-12-25
著者
-
Bhuiyan M.
College Of Veterinary Medicine Seoul National University
-
BHUIYAN M.
Department of Soil, Water and Environment, University of Dhaka
-
JANG Goo
Department of Theriogenology and Biotechnology, College of Veterinary Medicine, Seoul National Unive
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CHO Jongki
Department of Theriogenology, College of Veterinary Medicine, Chungnam National University
-
SHIN Sangtae
Department of Theriogenology, College of Veterinary Medicine, Chungnam National University
-
PARK Eulsoon
School of Agricultural Biotechnology, Seoul National University
-
KANG Sungkeun
Department of Theriogenology & Biotechnology, College of Veterinary Medicine
-
LEE Byeongchun
Department of Theriogenology & Biotechnology, College of Veterinary Medicine
-
HWANG Woosuk
Department of Theriogenology & Biotechnology, College of Veterinary Medicine
-
Jang Goo
College Of Veterinary Medicine Seoul National University
-
Jang Goo
Department Of Theriogenology And Biotechnology College Of Veterinary Medicine Seoul National Univers
-
Cho J
College Of Veterinary Medicine Seoul National University:school Of Agricultural Biotechnology Seoul
-
Hwang W.
College Of Veterinary Medicine Seoul National University:school Of Agricultural Biotechnology Seoul
-
Shin Sangtae
Department Of Theriogenology College Of Veterinary Medicine Chungnam National University
-
Park Eulsoon
School Of Agricultural Biotechnology Seoul National University
-
Kang S.
College Of Veterinary Medicine Seoul National University
-
Lee Byeongchun
College Of Veterinary Medicine Seoul National University
-
Bhuiyan M.
Department Of Soil Water And Environment University Of Dhaka
-
Bhuiyan M.
Department Of Life Sciences Faculty Of Agriculture Kagawa University
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