Simultaneous Detection of DAB and Methyl Green Signals on Apoptotic Nuclei by Confocal Laser Scanning Microscopy
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概要
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Observations of the fine structures of subcellular organelles and their pathophysiological changes have been made by many investigators by utilizing the many advantageous functions of confocal laser scanning microscopy (CLSM). However, reports of CLSM observations of fine inner structural changes of nuclei are rather rare. The usefulness and value of counterstaining in histochemical staining is widely appreciated. While observing methyl green (MG) nuclear-counterstained sections by CLSM, we found that fluorescence emitted through MG was clearly detected by CLSM. It is generally accepted that MG reacts specifically to double stranded (dbs)-DNA, as was proved by Umemura [30] in our laboratory.In the present study, MG-stained nuclei of the absorptive cells (terminal differentiating cells) of rat intestinal villi were observed by CLSM, and changes in the intensity and distribution of MG staining were examined. The small intestinal epithelial cells were also found to be slowly undergoing apoptosis. The apoptosis is thought to occur during the process of terminal differentiation, which takes about 48 hr. To examine those apoptotic changes, a TUNEL method, in which the 3'ends of fragmented dbs-DNAs are labeled with histochemically detectabledUTP, was employed. The interrelationship between cell functions, which can be detected by various histochemical observations of cytoplasmic substances, and cellular differentiation state, can be elucidated by using MG in CLSM.
- 日本組織細胞化学会の論文
著者
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伊東 丈夫
東海大学医学部教育・研究支援センター細胞科学部門
-
Takekoshi Susumu
Department of Pathology, Tokai University School of Medicine
-
Osamura Yoshiyuki
Department of Pathology Tokai University School of Medicine
-
Umemura Shinobu
Department of Pathology, Tokai University School of Medicine
-
Yasuda Masanori
Department of Pathology, Saitama Medical University International Medical Center
-
Watanabe Toshiteru
Research Laboratory School Of Medicine Tokai University
-
Takekoshi Susumu
日本獣医畜産大学 獣医学部獣医外科学教室
-
Osamura Y
Department Of Pathology Tokai University School Of Medicine
-
Osamura R.yoshiyuki
東海大学教育･研究支援センター
-
Watanabe K
Aoba Gakuen
-
Watanabe Keiichi
Department Of Internal Medicine School Of Medicine Tokai University
-
Itoh Johbu
Laboratories of Structure and Function Research Tokai University School of Medicine
-
Hasegawa Hideaki
Laboratories of Structure and Function Research Tokai University School of Medicine
-
Osamura Y
Department Of Pathology School Of Medicine Tokai University
-
Itoh Johbu
Department Of Laboratories For Structures And Function Research School Of Medicine Tokai University
-
Itoh Johbu
Laboratories For Structure And Function Research Tokai University School Of Medicine
-
Osamura Yoshiyuki
Department Of Pathology School Of Medicine Tokai University
-
Yasuda M
Department Of Pathology Tokai University School Of Medicine
-
Yasuda Masanori
Department Of Pathology School Of Medicine Tokai University
-
Ohsugi Y
Department Of Pathology School Of Medicine Tokai University
-
UMEMURA Shinobu
Cytology and Core Needle Biopsy Subcommittee of the Japanese Breast Cancer Society
-
Yasuda Masanori
Departments Of Pathology Tokai University School Of Medicine
-
Takekoshi Susumu
Department Of Pathodiagnostics Course Of Basic Clinical Science Tokai University School Of Medicine
-
Hasegawa H
Laboratory Of Structure And Function Research Tokai University School Of Medicine
-
Osamura Y
Department Of Pathology Tokai University School Of Of Medicine
-
Umemura S
Department Of Pathology Tokai University School Of Medicine
-
Umemura Shinobu
Department Of Pathology & Division Of Diagnostic Pathology Tokai University School Of Medicine
-
Yamazaki Michio
Department Of Pathology Saitama Medical University International Medical Center
-
Osamura Yoshiyuki
Department Of Pathodiagnostics Course Of Basic Clinical Science Tokai University School Of Medicine
-
Watanabe K.
Dept. Obst. And Gynec. St. Marianna Univ. Sch. Med.
-
Watanabe Keiko
Department Of Pathology And Biodefense Division Of Cellular And Molecular Pathology Faculty Of Medic
-
Osamura Yoshiyuki
Department Of Internal Medicine Tokai University School Of Medicine
-
Watanabe K.
Dept.of Phthology Tokai Univ.sch.of Med. : Aoba College
-
Watanabe Katsuto
Department Of Pathology School Of Medicine Tokai University
-
Umemura S
Tokai Univ. School Of Medicine
-
Yasuda Masanori
Department Of Pathology Saitama Medical University International Medical Center
-
Watanabe Keiichi
Department Of Applied Biological Science Faculty Of Agriculture Saga University
-
Yasuda Masanori
Department Of Neurosurgery Nippon Medical School
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