Phytophthora capsiciに対するモノクローナル抗体の性状

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Phytophthora capsici菌株IFO30696の菌糸磨砕液の上清を抗原として作製した3種のモノクローナル抗体 (PC1A6, PC1B2およびPC1C5) の性状を解析した。ショ糖加用ジャガイモせん汁液体培地で培養した供試菌の菌糸にリン酸緩衝液を加え磨砕後, 遠心分離(10,000×g, 15分)を行い, 上清をELISAとウエスタンブロット法の試料とした。この上清をさらに超遠心分離 (105,000×g, 2時間)して得た上清を, Sephadex G-200カラムクロマトグラフィーの試料ならびにプロテナーゼKおよび過よう素酸処理試験に用いた。その結果, 供試モノクローナル抗体が認識するエピトープはそれぞれ異なっており, PC1C5はPhytophthora属菌に対し特異的抗体であることが判明した。ウエスクンブロット法での結果, 各抗体はそれぞれ複数のバンドを検出したことから各抗体が認識するエピトープは SDS-PAGEにより分離された, 分子量の異なる複数の物質上に存在している可能性が示唆された。Sephadex G-200カラムクロマトグラフィーで排除容量付近に容出された画分はいずれの抗体に対しても高いELISA値を示すとともにタンパク質および糖の呈色反応を示した。プロテナーゼKおよび過よう素酸処理試験の結果, PC1A6は糖に, またPC1B2およびPC1C5はタンパク質にそれぞれ特異的な抗体である可能性が示唆された。
日本植物病理学会の論文
1994-04-25

Phytophthora capsiciに対するモノクローナル抗体の性状

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