リンゴステムグルビングウイルス感染組織中の二本鎖RNA分析

概要

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リンゴステムグルービングウイルス(ASGV)の10分離株について, 感染葉から2本鎖RNA (dsRNA)を抽出し, ASGV (P-209分離株)ゲノムの3'末端領域に対応するRNAプローブを用いてノーザンハイブリダイゼーション分析を行った。その結果, いずれの分離株でも3種類のウイルス特異的dsRNA(約6.5 kbp, 2.0 kbp, 1.0 kbp)が検出された。続いて, P-209ゲノムの異なる領域に対応する5種類のプラス鎖RNAプローブを用いて, P-209感染葉からのdsRNAを分析したところ, 5種類のウイルス特異的dsRNA [G-ds(6.5kbp), ds1(5.5kbp), ds2(4.5kbp), SG-ds1(2.0kbp), SG-ds1(1.0kbp)]が検出された。これらdsRNAのうち, G-dsはゲノムの複製型と考えられた。また, SG-ds1とSG-ds2はゲノムの3'末端側に位置していることから, ORF2および外被タンパク質(CP)遺伝子のサブゲノムRNAに対応するものと考えられた。P-209ゲノムの3'末端側領域(CP領域)のcDNAを発現ベクター(pET3a)に組み込み, 大腸菌でCPを発現させた。ORF1タンパク質(2105アミノ酸)の1869番目のメチオニンからの発現タンパク質はASGVtPとサイズが一致したことから, このメチオニンがCPの開始アミノ酸と推定された。
1997-12-25