リンゴステムグルービングウイルスLi-23分離株の全塩基配列とカリフラワーモザイクウイルス35S RNAプロモーターを含む感染性cDNAクローンの構築
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概要
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リンゴステムグルービングウイルスLi-23分離株(ASGV, Li-23)のゲノムRNAの全塩基配列を決定した。Li-23ゲノムは3'末端のポリA配列を除いて6496塩基からなり, 2つの翻訳読み取り枠(ORF)を含んでいた。ORF1は分子量241,768ダルトン(242K)のポリタンパク質をコードし, ORF2はORF1の内部の別のフレームに存在し, 分子量36,179ダルトン(36K)のタンパク質をコードしていた。Li-23ゲノムの塩基数とORFの配置は, ASGVのリンゴ分離株(P-209)とユリ分離株(L)のそれらと完全に一致していた。全塩基配列の相同性はLi-23とL間で98.4%, Li-23とP-209間で83.0%であった。Li-23ゲノムの完全長cDNAを, ゲノムの第一塩基から転写されるようにカリフラワーモザイクウイルスの35S RNAプロモーターの下流に連結した完全長cDNAクローン(pCT35SF)を構築した。pCT35SFをChenopodium quinoa葉にカーボランダム法で接種したところ, Li-23によるものと同様な症状が現れ, また免疫電子顕微鏡観察でASGV抗体と反応するウイルス粒子が検出された。さらにノーザンブロットおよびウエスタンブロット分析でゲノムRNAと外被タンパク質がそれぞれ検出され, pCT35SFが感染性を持つことが明らかになった。
- 1997-12-25
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