LAMP法による耐熱性溶血毒遺伝子陽性 Vibrio parahaemolyticusの海産魚介類からの検出法
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概要
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loop-mediated isothermal amplification（LAMP）に基づく遺伝子増幅を応用して、耐熱性溶血毒thermostable direct hemolysin（TDH）遺伝子を保有する腸炎ビブリオVibrio parahaemolyticus（V. p）を海産魚介類から迅速に検出する方法を開発した。本LAMP法の検出限界は8 cells／反応であった。本LAMP法によりTDH＋ V. p 15株は全株陽性と判定され、TDH－ V. p10株及びにV. p類縁菌29株は全株陰性と判定された。海産魚介類10検体にTDH＋ V. p生菌を0.5～1.2 cells／gを添加した実験では、37℃、5時間培養後、10倍濃縮により全検体からTDH遺伝子を検出した。本検査法は感度と特異性が高く、検査時間も約7時間と短いうえ、増菌培養の前後における成績の陽転により食品中のTDH＋ V. p生菌の確認も可能となるので、V. p食中毒の原因究明に有用と考える。
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