ヒト月経黄体の単層細胞培養によるsteroidogenesisの研究
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概要
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ヒト月経黄体単層細胞培養法の基礎的検索と同時に,progesterone(P),estradiol(E_2),17α-hydroxyprogesterone(17 OHP)の産生とhuman chorionic gonadotropin(hCG)に対する反応性を,in vivoのmodel化を目的として検討した.ヒト黄体細胞を分離し,20%仔牛血清添加TC199にて単層細胞培養を行い,ステロイドをradioim-munoassay法にて測定し,培養液中に放出されるP,E_2,17 OHPと,添加hCGに対する反応性を,細胞増殖率も併せ検討した.同時に組織化学的な3β-hydroxysteroid dehydrogenase(3β-HSD)活性の比較及び透過電顕等による形態学的観察を行つた.黄体細胞は単層培養により少なくとも40日間以上の生存を示した.P産生のbasal levelは培養6目目に27.5±8.7ng/10^5 cells/ml/2daysの値を示し,12日以降はpopulation doubling levelを増すにつれ数ngへと減少した.なお,この継代時にも細胞生存率は90%以上であり,培養10日目の黄体細胞の染色体分析においても,80%以上が正常の46,XXの核型を示した.hCG添加群ではP産生との間に正の相関がみられ,hCG 1OOng/mlでP産生は最大値をとった.また,hCG添加群の培養6日目におけるP産生値(83.9±13.4)は非添加群に比し約3倍の増加をみた.E_2,17 OHP産生はPに比し低値であり,有意な関係はつかめなかった.培養黄体細胞の形態面においては,位相差では分離細胞は球状でSudan Black染色で濃染する多数の細胞質内脂肪顆粒を有し,組織化学的に対照に比し強い3β-HSD活性を認め,電顕で豊富なミトコンドリアと粗面小胞体が観察された.以上の成績より,ヒト黄体の単層細胞培養系は,(1)P産生とhCG刺激に対する反応性,(2)形態学的観察により得られた黄体化の確認により,in vivoのmodel化となり得ることを明らかにした.
- 社団法人日本産科婦人科学会の論文
- 1982-02-01
著者
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