Prevotella nigrescens 由来赤血球凝集因子の性状について
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概要
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強い赤血球凝集活性を示すが, 綿毛構造をもたず, P. intermedia strain E18由来赤血球凝集因子(E18HA)に対する抗血清との間に沈降線を形成しなかったP. nigrescens strain E4から分離した赤血球凝集因子と, E18HAとの heterogeneityについて検討した. 菌体を剪断後, 超音波処理し, 35,000rpm, 2時間遠心した上清に赤血球凝集活性がみられた. 活性画分を Sepharose CL-4 Bカラムに供した結果, 第1ピークに続く画分に中程度の, また, 第2ピーク(E4HA)に高い活性がそれぞれみられた. これらの活性画分をE18HAに対する抗血清から分離したIgGとゲル内沈降反応させると, 両者とも明瞭な沈降線を形成した. ついで, 赤血球凝集活性はみられたが, E18HAの抗血清とは沈降線を形成しなかった P. intermedia ATCC 15032と赤血球凝集活性のみられなかった P. nigrescens strain P43および P77の菌体を剪断後, 超音波処理して E18HAの IgGと反応させた結果, 赤血球凝集活性のある P. intermedia ATCC 15032との間に沈降線が形成された. しかし, 凝集活性のない P. nigrescens strain P43とP77との間には沈降線はみられなかった. それゆえ赤血球凝集因子は, 機械的剪断と超音波処理で菌体から分離すると考えられる. E4HAを SDS-PAGEで泳動した結果, 40kDa付近に明瞭な1本のバンドが形成された. E18HAに対する IgGを用いた Western blottingで 40kDa付近に発色がみられた. それゆえ, E4HAは約40kDaのサブユニットをもつ赤血球凝集因子と考えられる. E4HAは耐熱性であり, trypsin, chymotrypsin および proteaseに感受性を示した. しかし, E4HAは β-glucosidaseで活性が消失する点で E18HAと異なっていた. また, E4HAは D-galactoseや lactoseで影響を受けず, _L-fucose, _L-rhamnose および maltoseの添加で活性が8倍まで増加している点でE18HAとは異なっていた. 以上の結果から, E4HAと E18HAの性状は異なるが, 本活性因子はタンパク-糖複合体で, 赤血球凝集活性をもつ P. intermedia や P. nigrescensに共通する因子であると考えられる.
- 1996-06-25
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