型糖鎖付加部位の決定 : ムチン型糖タンパク質へのアプローチ
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概要
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糖鎖付加異常疾患についての最近の知見は,タンパク質への糖鎖付加修飾の生物学的意義を明確に示している。糖タンパク質のアミノ酸配列の糖鎖付加部位に関する情報は,分子病理学あるいは構造機能関係を理解するための基本情報である。糖ペプチドの質量分析は,糖タンパク質の構造の問題を解明するのに中心的な役割を果たしており,特に N 型糖鎖に関しては,高分子量糖タンパク質に対してさえ有効な手段である。しかし,O 型糖鎖を含む糖ペプチドの部位特異的な解析は今なお困難である。その理由は,N 型糖鎖付加と異なり,O 型糖鎖付加を触媒する N アセチルガラクトサミン転移酵素には多数のアイソザイムがあって基質特異性が重複していることや,付加部位がクラスターを形成していることなどである。O 型糖鎖付加を予測可能にする明確なアミノ酸コンセンサス配列は知られていない。また質量分析について言えば,糖鎖付加部位の近傍にはセリンやスレオニンと同様にプロリンが頻出することが,衝突誘起解離/タンデム質量分析によるペプチド配列解析を困難にしている。この総説では,質量分析による O 型糖鎖付加部位決定に向けたアプローチ,すなわち糖ペプチドの濃縮,糖鎖除去,β 脱離/マイケル付加反応,電荷固定誘導体化などの低エネルギー衝突誘起解離をサポートする手法を要約し,さらに,ペプチド断片化の新たな方法である電子捕獲(移動)解離についても述べる。
- 2008-03-02
著者
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Wada Yoshinao
Department Of Molecular Medicine Research Institute Osaka Medical Center For Mch
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Wada Yoshinao
Department Of Molecular Medicine Osaka Medical Center
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TAJIRI Michiko
Department of Molecular Medicine, Research Institute, Osaka Medical Center for MCH
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Tajiri Michiko
Department Of Molecular Medicine Research Institute Osaka Medical Center For Mch
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