小腸粘膜上皮増殖因子グリセンチンの腸管免疫増強効果に関する基礎的研究

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【目的】種々の病態下で腸管粘膜防御機能は破綻して"Bacterial Translocation (BT)"を惹起するが, これを防止するためには, 消化管粘膜を維持する何らかの対策が必要である.本稿ではグリセンチンの腸管免疫系へ及ぼす効果を, 遺伝子工学的に精製されたヒトグリセンチンを用いてin vitroで検討した.【方法】ヒト胎児小腸上皮培養細胞(INT-407)を使用し, 以下の実験を行った.1)組織培養用径30mmの平底プレートに1 well当たり1×10^6個ずつ細胞を播種し, 10% FCS加MEM培地3mlで3日間培養した.その後, 2日間FCSを除いたMEM培地で培養し, グリセンチン添加群, 増殖因子無添加群(コントロール群), 10% FCS添加群の3群を作製して24時間後の培養液中及び細胞抽出液中のE-カドヘリン濃度を比較検討した.2)チャンバースライドに1 well当たり2×10^5個ずつ細胞を播種し, 上記と同様に調整してグリセンチン添加群, 増殖因子無添加群(コントロール群), 10% FCS添加群の3群を作製して24時間後にE-カドヘリン, ZO-1, IgA染色を行い, 共焦点レーザー走査顕微鏡にて染色陽性細胞を観察し比較検討した.【結果】1)培養液中のE-カドヘリンの濃度には有意差は認められなかったが, 細胞抽出液中ではグリセンチン添加群は非添加(コントロール)群の約1.3倍の濃度であった.2)E-カドヘリン, ZO-1, IgA染色では, グリセンチン添加群は非添加(コントロール)群に比して明らかに強く染色された.【結論】グリセンチンを添加することによって, 細胞間連結複合体を形成するタンパク質であるE-カドヘリン, ZO-1ともに, IgA分泌が増加した.これらのことから, グリセンチンは腸管粘膜上皮の機械的・免疫学的バリアー機能の増強を促すことが示唆された.
日本小児外科学会の論文
2005-06-20

小腸粘膜上皮増殖因子グリセンチンの腸管免疫増強効果に関する基礎的研究

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