リンゴ小球形潜在ウイルスベクターを用いたアンズ（Prunus armeniaca L.）およびウメ（P. mume Siebold & Zucc.）の遺伝子機能評価系の開発
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概要
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リンゴ小球形潜在ウイルス（apple latent spherical virus; ALSV）ベクターは，リンゴ（Malus × domestica Bork.），セイヨウナシ（Pyrus communis L.）およびニホンナシ（P. pyrifolia Nakai）などのバラ科果樹を含む幅広い植物種に無病徴で感染し，安定してウイルス誘導性ジーンサイレンシング（virus-induced gene silencing; VIGS）を誘導できることが報告されている．本研究では，ALSV ベクターを用いた VIGS 法により，アンズおよびウメの 2 種のサクラ属果樹の遺伝子機能評価系の開発を試みた．アンズのフィトエン不飽和化酵素（PHYTOENE DESATURASE; PDS）遺伝子の部分配列をクローニングし，ALSV RNA2 をコードするバイナリーベクター pBICAL2 の T-DNA 領域に組み込んだ．このコンストラクトおよび ALSV RNA1 をコードするバイナリーベクター pBICAL1 をそれぞれアグロバクテリウムに導入した．これらのアグロバクテリウム系統を同時に Nicotiana benthamiana の葉に接種し，組み換え ALSV を増幅した．増幅した組み換え ALSV を抽出し，遺伝子銃を用いてアンズおよびウメの子葉に接種した．数週間後，アンズの上位葉では PDS のノックダウンによる白化が観察されたが，ウメでは ALSV ベクターの感染が確認できなかった．サクラ属果樹における VIGS を利用した遺伝子機能評価の有効性について議論した．
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