水中コブロスタノールおよびコレステロールの多重イオン検出器を備えたガスクロマトグラフ質量分析計 (GC-MS-MID) による定量法
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概要
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コプロスタノールは,高等動物の糞便中にのみ見出される特異的なステロールであり,屎尿汚染指標として用いることができる.このコプロスタノールとコレステロールを広範な水環境における屎尿汚染指標として用いるために,GC-MS-MIDによる微量定量法を検討した. 検水中のステロールはn-ヘキサンにより抽出し,必要に応じ,エマルジョン消去処理,アルカリ加水分解を行ない,シリル化後,GC-MS-MIDにより定量する. n-ヘキサンによって検水からステロールを抽出する際,しばしばエマルジョンの生成がみられ,これにステロールが吸着し,回収率が低下する.本法では1N水酸化カリウム70%エチルアルコール溶液でエマルジョンを消去し,エマルジョンに吸着されたステロールを高効率で回収することを可能にした. 水環境中では,コプロスタノールはほぼ100%が遊離状態で存在していることが確認できたので,コプロスタノールのみを定量する際には,加水分解を省略できる.ただし,コレステロールは30%程度がエステルとして存在しているため,加水分解は必要である. 抽出したステロールはBSTFAによるシリル化を行ない,遊離ステロールよりも約10倍感度を向上させることができた.BSTFAによるシリル化は簡便で,分解生成物などがみられない. GC-MS-MIDによって,感度を従来のGC-FIDによる定量法の5×105倍前後に向上させることができた.検出限界は検水1lで,コプロスタノールは1 ng,コレステロールは3 ng程度である.本法によれば,これまで困難であった沿岸海域での屎尿汚染のモニタリングも容易に行なえる. また,GC-MS-MIDの使用は,試料中の共存物質の妨害を防ぎ,ピークの同定をより確実なものとする.
- 社団法人 日本農芸化学会の論文
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