家蚕幼虫の核酸消化酵素の改良精製法 : ホスファターゼおよびプロテアーゼとの分離
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概要
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A method has been devised for the improved purification of an endonuclease from the digestive juice of silkworm larvae, with special consideration for the complete elimination of phosphatase contamination. The method comprises ammonium sulfate precipitation, butanol treatment, Sephadex G-75 gel filtration, selective negative adsorption to DEAE-cellulose, CM-cellulose chromatography, and finally adsorption chromatography on hydroxylapatite gel. The extent of purification and yield of the nuclease attained were about 3, 000-fold and 8%, respectively. pH 10.3, 1_??_5×10-4M Mg2+ ion, and 0.1_??_0.2M NaCI are the optimal conditions for the nuclease action. The purified enzyme hydrolyses DNA, RNA, and polyadenylic acid at a similar rate. Exhaustive digestion products from these substrates were found to consist of exclusively mono-, di-, and trinucleotides terminated in 5-phosphate.
- 社団法人 日本農芸化学会の論文
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