體外培養組織ノ酵素ニ關スル研究 : 第1編 體外培養正常組織並ニ腫瘍組織ノ酵素ニ就テ
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概要
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Helmontニヨリ酵素ノ發見セラレテ以來,生化學的方面ニ於ケルコレガ研究頓ニ勃興シ,次イデPasteurニヨリテ生物學的意義ノ究明セラルルヤ,更ニ此ノ方面ノ檢索モ亦旺盛トナリ,斯クテ今日凡ユル生活現象ノ遂行ニ當リ酵素ノ必要缺クベカラザルハ何人モ疑ヒヲ懐カズ.加之,臨牀醫學ノ分野ニ於テモ酵素ノ檢索ハ生理的,病的現象ノ理解,疾病ノ診斷,豫後ノ判定等ニ資スル所與ツテ大ナリ.然レドモ,生體外ニ培養セラレタル組織ノ酵素ニ關スル研究ハ蓼々クルモノニシテ,或種ノ酵素ニ就テハ全ク文獻ヲ見ザル現状ナリ.抑々酵素ハ,獨リ生體ニ於テノミナラズ,體外ニ分離セラレタル組織ノ生活ニ對シテモ亦必要ナルベキハ想像ニ難カラズ.體外培養組織ハ體外ニ於テ生活シ,繁殖スル點ニ於テ所謂Ueberlebendト異ナリ,lebendナルガ故ニ,生活組織ノ研究ニハ最モ適合シ,近來好ンデ使用セルラルルニ至レリ.1907年Harison始メテ組織ノ體外培養ニ成功シ,更ニCarrel,Fischer等ニヨリテ培養術式ノ改良セラルルニ及ビ,爾後數多ノ文獻ニ接スルニ至リシモ,培養組織ノ新陳代謝ニ關シテハ,1927年Warburg及ビ其ノ門下ニヨリ始メテ報告セラレタレド,比較的近時ニ屬シ,從ツテ未ダ幾多ノ問題ヲ殘セリ.茲ニ於テ余ハ正常組織並ニ腫瘍組織培養時ノ酵素トシテぢあすたーぜ,りぱーぜ,ぺぷしん,かたらーぜヲ選ビテ其ノ消長ヲ檢シ,組織發育トノ關係,正常組織及ビ腫瘍組織ノ比較等ニ就テ稍々精細ニ觀察セリフ.實驗方法組織培養法ハかれる氏壜法ニ據レリ.即チ,家鶏胎兒ノ所要組織ヲ摘出シ,滅菌りんげる氏液中ニ於テ約1cmmノ細片トナシ,健康幼若雄性家鶏血漿並ニ家鶏胎兒墜搾液ヲ以テかれる壜内ニ培養シ,38℃ノ孵卵器内ニ靜置シ一定時ニ其ノ發育及ビ酵素ノ測定ヲ行フ.正常組織培養ニ際シテハ家鶏胎兒心臟及ビ脾臟,或ハ胃ヲ以テ培養ニ供セリ.腫瘍組織ノ培養ニハ稻本,藤浪系及ビ大島系家鶏肉腫組織ヲ以テシ,家鶏移植肉腫ノ適當ナル發育ヲ待チテ摘出シ,新鮮ナル肉腫組織ヲ培養ニ供セリ.培養並ニ準備ノ諸操作ハ凡テ無菌的ニ施行シ,培養ニ用フル器具等ハ總テ嚴重ナル消毒ヲ行フヲ要ス.酵素作用ノ測定ハ次ノ如シ.即チぢあすたーぜノ測定ハ1%澱粉液ニ被檢液1.0ヲ添加シ,pH6.8ノ燐酸緩衝液ヲ加ヘ,1時間38℃ノ恒温槽中ニ放置シ,其ノ前後ニ於ケル糖量ヲHagedorn-Jensen法ヲ以テ滴定シ其ノ増加量ヲ以テ糖化作用ヲ定ム.りぱーぜノ測定ハ1%ノものぶちりん溶液ニ被檢液1.0ヲ添加シ,24時間37℃ノ恒温槽中ニ放置シ,其ノ前後ニ於ケル酸度ヲふえのーるふたれいん溶液ヲ指示藥トシ,N/50苛性そーだ溶液ヲ以テ滴定シ,其ノ酸度ノ増加ヲ以テ酵素作用ヲ檢ス.ぺぷしんノ測定ハめつと・ろーる法ニ據リ蛋白消化ノ状態ヲ以テ之ヲ定ム.かたらーぜ測定ハ普通臨牀的ニ用ヒラルル白井,越智,井上法ニヨリ,N/50過まんがん酸加里溶液ヲ用ヒテ滴定セリ.對照實驗トシテ,正常組織培養時ニ於テハ,組織片ナキフ培養基ノミニ就キ上記ノ方法ニヨリテ檢索ヲ行フ.蓋シ,培養基トシテ用ヒタル血漿,胎兒壓搾液等ニ含マルル酵素ノ作用ヲ知ランガ爲ナリ.且滴定ニ當リテハ盲驗トシテ酵素作用ヲ失ハシメタル被檢液,或ハ酵素ヲ含マザル液等ヲ用ヒテ滴定ヲ行ヒタリ.斯クシテ得タル成績ハ對照及ビ盲驗ト比較シ,全實驗例ノ平均價ヲ以テ檢討セリ.尚腫瘍組織培養時ニハ正常組織培養ヲ以テ對照トシ上述ノ如ク酵素ノ檢索ヲ行ヘリ.實驗成績總括I)正常組織堰養時ぢあすたーぜハ増養基内ニ相當量存在シ,且組織ノ發育ト共ニ増加ノ傾向ヲ示ス.りぱーぜハ培養初期ニ於テ培養基内ニ相當量存在ス.サレド組織ノ發育ト共ニ漸次減少ス.組織ゑむるじおんニ就テハ對照ト殆ド大差ヲ認メザリキ.ぺぷしんハ,心臟組織ノ培養時ニハめつと・ろーる法ニ據リ證明シ得ザリキ.サレド胃組織ノ培養時ニハ僅少ナガラコレヲ證明シ得.シカモ培養日數ノ經過ト共ニ増加シ,組織ノ退行ト共ニ減少ス.かたらーぜハ,組織ゑむるじおん中ニ相當量存在シ且發育ト共ニ増加スルヲ知レリ.II)腫瘍組織培養時ぢあすたーぜハ既述正常組織培養時ニ見クルガ如ク培養基内ニ相當量存在シ,シカモ發育ト共ニ増加スル傾向ハ正常組織培養時ニ比シ大ナルヲ見ル.りぱーぜハ培養初期ヨリ既ニ培養基ニ存在スルモ發育ノ進ムニ從ヒ減少シ,正常組織ニ比シ減少速ナリ.ぺぷしんノ存在ハ僅少ナレドモ證明シ得ルハ正常胃組織時ト同樣ナルモ,腫瘍細織培養時ハ既ニ培養前期ニ相當量ニ存在スルヲ知レリ.かたらーぜ亦組織ゑむるじおん中ニ相當量存在スルハ正常組織ニ於ケルト同樣ナレドモ,發育ト共ニ増加スル傾向ハ速ニ且大ナリ.考按正常組織並ニ腫瘍組織培養時ニ於ケル蛋白,脂肪,炭水化物ノ新陳代謝ニ關スル檢索ハ既述ノ如ク未ダ幾多ノ問題ヲ殘セリ.且從來ハ主トシテ形態學的檢索ニ據リシ報告多ク,生化學的檢索ハ僅カニ數種ノ文獻ヲ散見スルニ止マル.飜ツテ惟フニ,體外培養組織ノ新陳代謝ニ酵素ノ關與スベキハ從來ノ業績ニ明ラカニシテ,既ニ一,二酵素ノ存在モ亦證明セラレタリト雖モ,單ニ組織學的檢索ノミニ終始シ,其ノ消長ニ關シテハ未ダ精細ナル觀察ヲ缺キ,或ハ培養基自身ニ含マレタル酵素ノ作用ヲ等閑ニ附シ,或ハ直ニ組織學的變化ノミニヨリテ理解セントシ,又或種組織ノ培養時培養基溶解ヲ見ルハ,恐ラク酵素ニヨルモノナラント想像セルニトドマル.余ノ成績ハ培養組織發育ノ檢索ト共ニ生化學的檢索ヲモ併セ行ヒ,且得タル二,三ノ事實ハ從來交獻ニ見ザリシ酵素ノ存在及ビ各種酵素ノ消長ヲ明ニシ,以テ培養組織ノ新陳代謝ノ理解ニ資スル所アルベキヲ信ズ.結論上述ノ成績ヨリ下記ノ如キ結論ヲ得.正常組織培養時ニアリテハ次ノ如シ.1)ぢあすたーぜハ培養基中ニ常ニ相當量存在シ,組織發育ト共ニ増量ス.2)培養基中ニハりぱーぜヲ證スレドモ,組織ノ發育ト共ニ増加スルヲ認メ得ザリキ.3)ぺぷしんハ胃組織培養時ノミ稍々著明ニ認メラレ,培養前半期ニ顯著ナリ.4)かたらーぜハ組織えむるじおん中ニノミ存在シ,組織發育ト共ニ増加ス.家鶏肉腫組織培養時ニアリテハ次ノ如シ.1)ぢあすたーぜハ培養基中ニ相當量存在シ,正常組織培養時ニ比シ發育ニ伴フ増加ハ速ナリ.2)りぱーぜハ培養基中ニ存在スレドモ,發育ニ伴フ増量ヲ認メ得ズ.3)ぺぷしんハ胃組織ニ比シ培養當初ヨリ稍々顯著ニ認メラレル.4)かたらーぜハ組織えむるじおん中ニノミ存在シ,増量ハ正常組織ニ比シテ速ナリ.
- 京都府立医科大学の論文
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