ラット脳におけるGonadotropin Releasing Hormoneの遺伝子発現 : オリゴRNAプローブを用いたin situ hybridization
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概要
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GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) 細胞体の局在部位に関して, immunohistochemistryによる検討が多数報告されているが, 細胞内のGnRH mRNAを検出してその産生細胞を検討した報告は少ない。そこで, GnRH産生細胞の局在を検討するため, 成熟雌ラットの脳よりmRNAを抽出してNorthern blottingを行うとともに, 脳の凍結切片を作成してin situ hybridizationを行った。Northern blottingではGnRH mRNAが単一バンドとして確認され, またin situ hybridizationではGnRH mRNAを銀粒子として検出することができ, GnRH産生細胞が視索前野および対側角に存在することが明らかにされた。今回用いたプローブはGnRHデカペプチドをコードする部分のmRNAに相補的なオリゴRNAプローブ (62-mer) である。オリゴRNAプローブを用いたNorthern blottingおよびin situ hybridization は新しい方法であり, これを用いた報告はまだ少ない。このオリゴRNAプローブの長所は, 比較的簡単に作成できること, in situ hybridizationでは細胞内への移行性が良好であること, またRNA:RNAの結合が安定なため効果的な洗いが可能でバックグラウンドを軽減できること等であり, その有用性が強く示唆された。
- 社団法人日本産科婦人科学会の論文
- 1988-12-01
著者
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