ラット卵巣におけるGonadotropin Releasing Hormoneの遺伝子発現
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概要
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ラット卵巣にGonadotropin Releasing Hormone (GnRH)あるいはGnRH様物質が存在し, 卵巣における卵胞発育, ステロイド産生に直接的に作用し, 調節することが示唆されているが, その詳細はいまだ不明な点が多い. そこで, GnRH遺伝子に相補的なcRNAプローブを用いたnorthern blotting およびin situ hybridizationにより, ラット卵巣におけるGnRH遺伝子発現を明らかにし, その産生部位を検討した. cRNAプローブ(62-mer)は, GnRH mRNAのデカペプタイドをコードする部分に相補的なオリゴヌクレオチドを合成し, SP6プロモーターを含むpSP64プラスミドに組み込んで作成した. 初めに,10週齢のSprague-Dawley系雌ラットの視床下部, 肝臓, 卵巣よりそれぞれmRNAを抽出してnorthern blottingを行うと, 視床下部に約500bpのバンドを認めたが, 肝臓にはバンドを認めなかった. 卵巣では約700bpのバンドを認め, 卵巣においてもGnRH遺伝子が発現していることが確認されたが, 視床下部と卵巣ではmRNAの大きさが異なることを明らかにした. さらに, 卵胞発育過程におけるGnRH遺伝子の発現の変化を検討するために, 4週齢の幼若ラットに25IUのPMSGを投与し, 卵巣mRNAのnorthern blottingを同様に行つた. その結果, PMSG投与前にはバンドは認められなかったが, 投与後48時間のものに約700bpのバンドが認められた. また,卵巣内のGnRH産生細胞の局在を検討するためにin situ hybridizationを行つたところ, 顆粒膜細胞に銀粒子の集積が認められ, このGnRH 産生はPMSG投与により促進されることを明らかにした. 以上より, ラット卵巣でGnRHが産生されていることを明らかにしたが, GnRHはparacrineまたはautocrine機序で局所的に卵巣機能を調節している可能性が示唆された.
- 社団法人日本産科婦人科学会の論文
- 1989-11-01
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